[发明专利]西方伊萨酵母、热带假丝酵母配合使用的脱毒发酵方法，及产品制备工艺

权利要求书

1.一种半纤维素水解物脱毒发酵方法，其特征在于，所述水解物用西方伊萨酵母Issatchenkia occidentalis(Lj-3)为生物脱毒菌株，用能发酵五碳糖生成木糖醇的微生物为发酵菌株。

2.根据权利要求1所述的半纤维素水解物脱毒发酵方法，其特征在于，所述西方伊萨酵母Issatchenkia occidentalis(Lj-3)为CCTCC NO：M 206097。

3.根据权利要求1所述的半纤维素水解物脱毒发酵方法，其特征在于，所述发酵酵母为热带假丝酵母Candida tropicalis。

4.根据权利要求3所述的半纤维素水解物脱毒发酵方法，其特征在于，所述热带假丝酵母Candida tropicalis为CCTCC NO：M205067。

5.根据权利要求1至4的任一项所述的半纤维素水解物脱毒发酵方法，其特征在于，所述半纤维素水解物用如下步骤制备：

S1.向浸水的植物材料加入稀盐酸或稀硫酸溶液，使所述植物材料中的半纤维素发生水解；

S2.水解结束，压滤获得溶液部分，该溶液部分即为半纤维素水解物；

S3.将S2步骤获得的半纤维素水解物用碱调节pH值，获得可用于生物脱毒的半纤维水解物。

6.根据权利要求2所述的半纤维素水解物脱毒发酵方法，其特征在于，所述脱毒菌株种子液的培养步骤如下：

S1.按照如下组分要求制备种子培养基：葡萄糖50g/L，MgSO₄.7H₂O2g/L，K₂HPO₄4g/L，KH₂PO₄6g/L，酵母膏5g/L；

S2.将所述CCTCC NO：M206098的斜面培养物接入液体种子培养基，装液量为摇瓶容量的20％，在27--30℃，转速200rmp条件下摇床培养12～18小时，获得可用于脱毒的种液。

7.根据权利要求2所述的半纤维素水解物脱毒发酵方法，其特征在于，所述半纤维素水解物脱毒包含如下步骤：

S1.向半纤维素水解物接入CCTCC NO：M206097活细胞，培养温度20～33℃，通气培养一定时间；

S1.除去S2步骤中的半纤维素水解物所含的菌体，得到发酵性能良好的，以五碳糖为主要成分的半纤维素水解物。

8.根据权利要求4所述的半纤维素水解物脱毒发酵方法，其特征在于，所述发酵菌株种子液的培养步骤如下：

S1.按照如下组分要求制备种子培养基：葡萄糖20g/L，木糖20g/L，MgSO₄.7H₂O 2g/L，K₂HPO₄4g/L，KH₂PO₄6g/L，酵母膏5g/L；

S2.将所述CCTCC NO：M205067的斜面培养物接入液体种子培养基，装液量为摇瓶容量的20％，在27--30℃，转速200rmp条件下摇床培养12～18小时，获得发酵菌株种子液。

9.根据权利要求2和4所述的半纤维素水解物脱毒发酵方法，其特征在于，所述方法对预先进行脱毒处理后获得的半纤维素水解物后续进行木糖醇发酵，并且其步骤如下：

S1.对经过CCTCC NO：M206097发酵脱毒的半纤维素水解物真空浓缩至木糖约150g/L，氨水调节至pH＝6，另加入酵母膏5g/L，得到用于木糖醇发酵的半纤维素水解物培养基；

S2.木糖醇发酵用摇瓶进行，摇瓶装量10％，按5％(v/v)接种量接入CCTCCNO：M205067种子液，200rmp，33℃进行发酵至木糖消耗完；

S3.收集离心沉淀的菌体，投入到新鲜的半纤维素水解物培养基中继续新一轮的木糖醇发酵，离心上清液制备木糖醇。