[发明专利]无蛋白质配子和胚胎处理及培养基产品

说明书

发明领域

本发明涉及专门用于人类生殖和生育程序，并且针对该程序经过优化的无蛋白质培养基(PFM)。本文中描述的基本上无蛋白质的培养基产品可用于防止结合于蛋白的病原体(特别是朊病毒等)传播给正在接受不孕症治疗的患者、通过辅助生殖技术(ART)怀育的新生儿、和这些领域的从业人士，特别涉及在人ART中的应用。

发明背景

用于人类ART程序(procedures)的传统市售胚胎培养基含有从人血液和组织来源获得的人血清白蛋白(HAS)。在一些实验室中，也使用类似地从牛血液和组织来源获得的牛血清白蛋白(BSA)作为人类胚胎培养程序中蛋白质的来源(Loutradis et al.，1992；Quinn，1994)。含有HSA和BSA的培养基的效力据报道是相似的(Staessen et al.，1998)。在培养基中使用从供体(人类或牛)获得的蛋白质有将疾病传播给接受辅助怀孕治疗的患者的潜在可能。

近年来尚未有人描述过在化学限定的(没有添加的蛋白质或白蛋白、或动物或人来源的蛋白提取物)培养系统中，从收集卵母细胞开始，随后进行精子冲洗(sperm washing)、授精、受孕到卵裂胚阶段，最后进行胚胎移植，产生活的人类胚胎的过程。尽管近年来报道了用于小鼠、家兔和灵长类动物的化学限制培养基(Spindle，1995；Li et al.，1996；Schramm and Bavister，1996)，。先前声称的用于人类的化学限定无蛋白质培养基(PFM)实际上不是真的没有蛋白质，因为用于受精的精子仍然是在含有血清蛋白的培养基中制备的(Mohr & Trounson，1986；Serta and Kiessling 1997(Abst)；Parinaud et al.1999)。因此，迄今为止尚未描述过用于ART程序的完全无蛋白质的培养基。

本领域中需要有用于产生活的早期分裂阶段的人类胚胎的化学限定培养基，以避免使用潜在有危险的供体蛋白，保证正在进行辅助生殖治疗的患者的安全。人们对可能传播病原性疾病(pathogenic disease)，特别是病毒性疾病，例如人类获得性免疫缺陷综合征(AIDS)和肝炎，或者由血源产物中的朊病毒等传播的Creutzfeldt-Jakob病(CJD)等的担忧，已经促使全世界ART领域内的许多医疗服务供应商开始搜寻供体蛋白的替代物来用于胚胎培养和处理程序。

致死性病毒疾病(AIDS)通过血源产品对血友病患者的传播已经有大量的文献记录(见例如Craven et al.，1997，Med.Sci.Law 37：215-227；Keshavjeeet al.，2001，Soc.Sci.Med.53：1081-1094；Weinberg et al.，2002，Ann.Intern.Med.136：312-319；Evatt，2006，Semin.Hematol.43：S4-9)。从垂体提取的人类生长激素已被发现能够向人体传播CJD(Esmonde et al.，1994)，并且人促性腺激素注射也能够在人与人之间传播CJD(CDC，1985)。CJD可以通过血液传播(尽管CJD朊病毒的滴度在血液中较低；Heye et al.，1994)。过去曾在大约200名IVF患者在接受了在含有被乙型病毒污染的混合血清(pooled sera)的培养基中培养的胚胎后发生了乙型肝炎流行(van Os et al.，1991)。最近，科学界面临着这样的难题，即必须通知他们的患者，用于胚胎培养和处理的市售培养基制剂可能被由后来死于CJD的人捐献的白蛋白所污染(Kemmann，1998)。