[发明专利]具有阿魏酸酯酶活性的多肽和编码该多肽的多核苷酸

权利要求书

1.一种具有阿魏酸酯酶活性的分离的多肽，其选自下组：

(a)包含氨基酸序列的多肽，所述氨基酸序列与SEQ ID NO：2的成熟多肽具有至少75％同一性；

(b)由多核苷酸编码的多肽，所述多核苷酸在至少中-高严紧条件下与以下杂交：(i)SEQ ID NO：1的成熟多肽编码序列，(ii)包含于SEQ ID NO：1的成熟多肽编码序列中的cDNA序列，或(iii)(i)或(ii)的全长互补链；

(c)由多核苷酸编码的多肽，所述多核苷酸包含与SEQ ID NO：1的成熟多肽编码序列具有至少75％同一性的核苷酸序列；和

(d)SEQ ID NO：2的成熟多肽的包含取代、缺失和/或插入一个或多个(几个)氨基酸的变体。

2.权利要求1的多肽，其包含SEQ ID NO：2的氨基酸序列或其具有阿魏酸酯酶活性的片段，或由SEQ ID NO：2的氨基酸序列或其具有阿魏酸酯酶活性的片段组成。

3.权利要求1的多肽，其由多核苷酸编码，所述多核苷酸包含SEQ ID NO：1的核苷酸序列或其编码具有阿魏酸酯酶活性的片段的亚序列，或由SEQ ID NO：1的核苷酸序列或其编码具有阿魏酸酯酶活性的片段的亚序列组成。

4.权利要求1的多肽，其由多核苷酸编码，所述多核苷酸包含在大肠杆菌NRRL B-50077所含的质粒pHinsFAEB1中。

5.分离的多核苷酸，其包含编码权利要求1-4中任一项的多肽的核苷酸序列。

6.核酸构建体，其包含权利要求5的多核苷酸，所述多核苷酸与一个或多个(几个)调控序列可操作地连接，所述调控序列指导所述多肽在表达宿主中产生。

7.重组宿主细胞，其包含权利要求6的核酸构建体。

8.用于产生权利要求1-4中任一项的多肽的方法，其包括：(a)在有益于所述多肽产生的条件下培养细胞，所述细胞以其野生型形式产生所述多肽；和(b)回收所述多肽。

9.用于产生权利要求1-4中任一项的多肽的方法，其包括：(a)在有益于所述多肽产生的条件下培养包含核酸构建体的宿主细胞，所述核酸构建体包含编码所述多肽的核苷酸序列；和(b)回收所述多肽。

10.用于产生亲本细胞的突变体的方法，所述方法包括破坏或缺失编码权利要求1-4中任一项的多肽的核苷酸序列，其导致突变体与亲本细胞相比产生较少的所述多肽。

11.通过权利要求10的方法产生的突变细胞。

12.用于产生权利要求1-4中任一项的多肽的方法，其包括：(a)在有益于所述多肽产生的条件下培养转基因植物或植物细胞，所述转基因植物或植物细胞包含编码所述多肽的多核苷酸；和(b)回收所述多肽。

13.转基因植物、植物部分或植物细胞，其已经用编码权利要求1-4中任一项的多肽的多核苷酸转化。

14.双链抑制性RNA(dsRNA)分子，其包括权利要求5的多核苷酸的亚序列，其中可选地所述dsRNA是siRNA或miRNA分子。

15.抑制细胞中具有阿魏酸酯酶活性的多肽的表达的方法，其包括对细胞施用或在细胞中表达双链RNA(dsRNA)分子，其中dsRNA包括权利要求5的多核苷酸的亚序列。

16.核酸构建体，其包含编码蛋白质的基因，所述基因与编码信号肽的核苷酸序列可操作地连接，所述信号肽包含SEQ ID NO：2的氨基酸1至18或者由SEQ ID NO：2的氨基酸1至18组成，其中所述基因对于所述核苷酸序列是外源的。

17.重组宿主细胞，其包含权利要求16的核酸构建体。

18.用于产生蛋白质的方法，其包括：(a)在有益于所述蛋白质产生的条件下培养权利要求17的重组宿主细胞；和(b)回收所述蛋白质。

19.用于降解含木聚糖材料的方法，其包括用权利要求1-4中任一项的具有阿魏酸酯酶活性的多肽处理所述含木聚糖材料。

20.权利要求19的方法，其进一步包括用木聚糖降解酶处理所述含木聚糖材料。