[发明专利]肝细胞癌细胞特异性的肽及其应用

说明书

优先权声明

本申请要求2007年11月20日提交的临时申请60/996,488的优先权，通过述及将其完整收录。

发明背景

在全世界范围，肝细胞癌(HCC)是第十位最致命的癌症相关杀手。即便是随着外科手术、放射和化学疗法的进步和联合，HCC的预后依然不佳(1)。尽管进行了攻击性的常规治疗，在美国肝癌患者的5年存活率依然只有8.9％，这使得此恶性肿瘤成为位于胰腺导管腺癌(5年时存活4.4％)之后的第二位最致命的癌症(2)。2005年，全世界有超过667,000例新增肝癌病例，其中80％在亚洲和撒哈拉沙漠以南非洲(3)。随着分子肿瘤学领域的极大进步，新的治疗策略正在不断被研发以试图治愈此疾病。

开发肿瘤细胞和非恶性肿瘤对应物的区分得到改进的针对癌症的靶向治疗法是当前抗癌研究的主要目标之一。大多数化疗剂并不优先积聚于肿瘤部位。实际上，到达肿瘤的剂量可能少到仅有积聚于正常器官剂量的5％-10％(4)。毒性副作用经常限制了抗癌药物的剂量扩大，导致不完全的肿瘤响应、早期的疾病复发及最终形成耐药性。开发了多种方法来改善抗癌药物的选择性毒性，诸如将抗癌药物封装于递送系统中(5)及通过与过表达的或独特表达于癌细胞上的抗原或受体结合的单克隆抗体(6，7)或肽配体(8，9)使抗癌药物瞄准目标。

已经调查了药物递送系统(DDS)，诸如基于脂类或聚合物的抗癌纳米医学(10)。DDS通常指直径200nm或更小的纳米颗粒和微米颗粒，包括脂质体和其它基于脂质的载体，诸如微团、脂质乳剂和脂质-药物复合物；还包括聚合物-药物偶联物及各种配体靶向产品诸如免疫偶联物(11)。肿瘤脉管系统的超通透性是决定基于聚合物的癌症治疗法成功靶向肿瘤的关键因素之一(12)。在静脉内施药后，血管发生中的肿瘤脉管系统的“易漏”，据估计平均孔径为100-600nm(13)，允许肿瘤组织中的偶联物选择性外渗。此外，肿瘤组织常常缺乏有效的淋巴排除，这随后促进聚合物滞留。这些因素联合起来导致偶联物在肿瘤组织中积聚-一种被动靶向现象，被Maeda命名为“增强的通透性和滞留(EPR)效应”(14)。经由脂质体进行的由EPR介导的被动肿瘤靶向可导致在实体瘤中的药物浓度相对于游离药物获得的浓度而言升高数倍(15)。

DDS的特殊力量在于它们改变其相关治疗法的药动学和生物分配的潜力(5)。将聚乙二醇(PEG)或其它惰性聚合物与各种治疗性分子偶联可能减少肾脏和网状内皮系统(RES)对药物的清除(16)。对于较大的微粒载体诸如脂质体和聚合物-药物偶联物而言，载体的大小(通常为直径50-200nm)使其主要局限于血液隔室，对正常器官的有害作用较小。

现在批准用于胃肠外施用的DDS大多包括脂质体或基于脂质的配制剂及与PEG连接的治疗性分子，例如PEG化的脂质体多柔比星，其用于治疗高度血管发生性肿瘤诸如AIDS相关卡波西氏肉瘤，总响应率为43％和59％(17，18)。然而，微粒DDS引起药物在肝脏、脾脏和骨髓的单个核吞噬细胞系统细胞中积聚增加，而且存在对这些组织毒性增加的可能性(19)。此外，随着循环时间的延长和微粒DDS的限制，血液学毒性诸如嗜中性粒细胞减少症、血小板减少症和白细胞减少症也变得明显了(20)。正努力通过将其与靶向肿瘤细胞和肿瘤脉管系统表面抗原或受体的配体联合来增强DDS的位点特异性作用，这一过程称为主动的或配体介导的靶向作用(8，21)。此外，正在调查将化疗药物经由亲和靶向作用递送至肿瘤组织(22，23)。

尽管单克隆抗体已显示出作为肿瘤靶向剂的临床潜力，但抗体由于其大小而造成的肿瘤渗透差及由于非特异性抗体摄取而引起的肝脏/骨髓毒性是抗体疗法的两项主要限制。肽靶向剂可能使与抗体癌症疗法相关的问题减轻(24)。将组合文库展示于微生物上是鉴定肿瘤特异性靶向配体的一种可能策略。

噬菌体展示技术已应用于鉴定B细胞表位(25-27)、发现肿瘤细胞(8，28，29)和肿瘤脉管系统特异性肽(30-33)。将DDS与肿瘤特异性肽联合可能导致多达数千种抗癌药物分子仅仅经由少许靶向配体分子就被递送至肿瘤细胞处。抗癌药物分子在肿瘤部位的持续释放可能也具有治疗优势(8，34)。

发明概述

本公开包括单独的或组合的以下内容等：