[发明专利]耐热酵母多形汉逊酵母在高温的产乙醇的木糖发酵

权利要求书

1.一种分离的多形汉逊酵母物种的产乙醇酵母，其中所述酵母包含选自以下组成的组的至少一种修饰：

(a)ATH1(酸性海藻糖酶)基因失活；

(b)与亲株相比过表达多形汉逊酵母的蛋白木酮糖激酶；和

(c)与亲株相比过表达多形汉逊酵母的蛋白热激蛋白104。

2.一种生产乙醇的方法，包括以下步骤：

a)在培养基中培养权利要求1的酵母以在所述培养基中产生和积聚乙醇；并

b)从所述培养基收集乙醇。

3.根据权利要求2所述的方法，其中所述培养基包含D-木糖。

4.根据权利要求2所述的方法，其中所述产生在高于约48℃的温度发生。

5.根据权利要求2所述的方法，其中所述ATH1基因由于所述酵母的ATH1基因的突变、破坏、部分缺失和/或缺失而被失活。

6.根据权利要求2所述的方法，其中所述ATH1基因由于控制所述ATH1基因表达的至少一种调控元件的突变、破坏、部分缺失和/或缺失而被失活。

7.根据权利要求1所述的酵母，其中所述酵母包含失活的ATH1基因。

8.一种生产乙醇的方法，包括：

a)在含有D-木糖作为碳源的培养基中培养权利要求8的酵母，允许乙醇积聚；并

b)从所述培养基收集乙醇，其中所述多形汉逊酵母产生乙醇的水平高于具有活性ATH1基因的多形汉逊酵母产生乙醇的水平。

9.根据权利要求1所述的酵母，其中在含有D-木糖作为主要碳源的培养基中所述酵母产生乙醇的量和/或产率大于亲本多形汉逊酵母菌株产生乙醇的量和/或产率。

10.根据权利要求1所述的酵母，其中所述酵母包含比对照菌株更高拷贝数的多形汉逊酵母木酮糖激酶(XYL3)基因。

11.根据权利要求1所述的酵母，其中所述酵母包含处于非天然启动子控制下的至少一个XYL3基因。

12.根据权利要求12所述的酵母，其中所述非天然启动子选自多形汉逊酵母的甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)启动子(GenBank#AY550078)组成的组。

13.根据权利要求1所述的酵母，其中所述酵母与亲株相比过表达多形汉逊酵母的木酮糖激酶，其中在含有D-木糖作为主要碳源的培养基中所述酵母产生乙醇的量和/或产率大于亲本多形汉逊酵母菌株产生乙醇的量和/或产率。

14.一种生产乙醇的方法，包括：

a)在含有D-木糖作为碳源的培养基中培养权利要求14的酵母，允许乙醇积聚；并

b)从所述培养基收集乙醇，其中所述多形汉逊酵母产生乙醇的水平高于不过表达多形汉逊酵母的木酮糖激酶蛋白的多形汉逊酵母产生乙醇的水平。

15.根据权利要求2所述的方法，其中所述酵母包含比对照菌株更高拷贝数的多形汉逊酵母热激蛋白(HSP104)基因。

16.根据权利要求2所述的方法，其中所述酵母包含处于非天然启动子控制下的至少一个HSP104基因。

17.根据权利要求17所述的方法，其中所述非天然启动子选自多形汉逊酵母的甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)启动子(GenBank#AY550078)组成的组。

18.根据权利要求1所述的酵母，其中所述酵母与亲株相比过表达多形汉逊酵母的蛋白热激104蛋白，其中在含有D-木糖作为主要碳源的培养基中所述酵母产生乙醇的量和/或产率大于亲本多形汉逊酵母菌株产生乙醇的量和/或产率。

19.一种生产乙醇的方法，包括：

a)在含有D-木糖作为碳源的培养基中培养权利要求19的酵母，允许乙醇积聚；并

b)从所述培养基收集乙醇，其中所述多形汉逊酵母产生乙醇的水平高于不过表达多形汉逊酵母的热激104蛋白的多形汉逊酵母产生乙醇的水平。

20.一种多形汉逊酵母菌株，保藏号为NRRL Y-50061。