[发明专利]被改造以产生异丙醇的微生物

权利要求书

1.一种重组微生物，包括从适当的碳底物的发酵生产异丙醇的生物化学途径，所述生物化学途径包括乙酰辅酶A乙酰基转移酶，其中所述微生物包括至少一种与相应的亲代微生物相比异源的多肽。

2.如权利要求1所述的重组微生物，包括与亲代微生物相比具有乙酰辅酶A乙酰基转移酶活性的多肽表达升高，其中所述重组微生物从包括乙酰辅酶A的底物产生包括乙酰乙酰辅酶A的代谢物。

3.如权利要求2所述的重组微生物，其中所述具有乙酰辅酶A乙酰基转移酶活性的多肽由与SEQ ID NO：30、66、68或66和68中所示的序列具有至少约50％同一性的多核苷酸编码。

4.如权利要求2所述的重组微生物，其中所述具有乙酰辅酶A乙酰基转移酶活性的多肽由atoB基因或其同源物，或fadA基因或其同源物编码。

5.如权利要求4所述的重组微生物，其中所述atoB基因或fadA基因来自埃希杆菌属。

6.如权利要求5所述的重组微生物，其中所述埃希杆菌是大肠杆菌。

7.如权利要求1所述的重组微生物，其中所述微生物是重组大肠杆菌。

8.如权利要求7所述的重组微生物，其中所述具有乙酰辅酶A乙酰基转移酶活性的多肽由与SEQ ID NO：32中所示的序列具有至少约50％同一性的多核苷酸编码。

9.如权利要求7所述的重组微生物，其中所述具有乙酰辅酶A乙酰基转移酶活性的多肽由thl基因或其同源物编码。

10.如权利要求9所述的重组微生物，其中所述thl基因来自梭菌属。

11.如权利要求10所述的重组微生物，其中所述梭菌是丙酮丁醇梭菌。

12.如权利要求1所述的重组微生物，包括与亲代微生物相比具有乙酰乙酰辅酶A转移酶活性的多肽表达升高，其中所述重组微生物从包括乙酰乙酰辅酶A的底物产生包括乙酰乙酸的代谢物。

13.如权利要求12所述的重组微生物，其中所述乙酰乙酰辅酶A转移酶由atoAD基因或其同源物编码。

14.如权利要求13所述的重组微生物，其中所述atoAD基因来自大肠杆菌。

15.如权利要求1所述的重组微生物，包括与亲代微生物相比具有乙酰乙酸脱羧酶活性的多肽表达升高，其中所述重组微生物从包括乙酰乙酸的底物产生包括丙酮的代谢物。

16.如权利要求15所述的重组微生物，其中所述乙酰乙酸脱羧酶由adc基因或其同源物编码。

17.如权利要求16所述的重组微生物，其中所述adc基因来自丙酮丁醇梭菌、溶纤维丁酸弧菌、热解糖高温厌氧杆菌和艰难梭菌。

18.如权利要求17所述的重组微生物，其中所述微生物是丙酮丁醇梭菌。

19.如权利要求1所述的重组微生物，包括与亲代微生物相比具有仲醇脱氢酶活性的多肽表达升高，其中所述重组微生物从包括丙酮的底物产生包括异丙醇的代谢物。

20.如权利要求19所述的重组微生物，其中所述具有仲醇脱氢酶活性的多肽由与SEQ ID NO：7或9任一个中所示的序列具有至少约50％同一性的多核苷酸编码。

21.如权利要求19所述的重组微生物，其中所述具有仲醇脱氢酶活性的多肽由adh或sadh基因或其同源物编码。

22.如权利要求21所述的重组微生物，其中所述ccr基因来自布氏热厌氧杆菌或拜氏梭菌。

23.如权利要求1所述的重组微生物，其中所述适当的碳底物包括葡萄糖。

24.如权利要求1所述的重组微生物，其中所述重组微生物包括编码催化乙酰辅酶A转变为乙醇、催化丙酮酸转变为乳酸、催化乙酰辅酶A和磷酸转变为辅酶A和乙酰磷酸、催化乙酰辅酶A和甲酸转变为辅酶A和丙酮酸、或乙酰辅酶A的乙酰基与3-甲基-2-氧代丁酸(2-氧代异戊酸)的缩合的酶的基因中的一个或多个缺失或敲除。

25.如权利要求1所述的重组微生物，进一步包括降低的乙醇脱氢酶活性、乳酸脱氢酶活性、磷酸乙酰基转移酶活性或其任何的组合。