[发明专利]用于体外诊断和/或体外治疗监测感染的方法

说明书

本发明涉及一种用于体外诊断和/或体外治疗监测感染和/或感染性疾病的方法，特别是用于区分急性感染和潜伏性或痊愈感染的方法，以及一种相应的试剂盒。

为了识别内源性结构和抵御外源性生物体或物质，诸如动物或人的高等生物体拥有一套高度复杂的免疫系统。人类免疫系统可以被细分为两组防御机制。在体液免疫和细胞免疫防御之间存在差异。遗传性免疫防御被设计为自然免疫。如果免疫是仅在接触外源性物质‘抗原’后形成的，则免疫被命名为获得性免疫。对于这种类型的严格具体机制，白细胞，例如单核细胞、粒细胞以及T和B淋巴细胞在细胞和体液防御中起重要作用。

在感染或感染性疾病的情况下，机体能够对多种抗原产生反应。由于B淋巴细胞增殖，特别是克隆扩增，结合分化过程中其它防御细胞的选择，机体通常能够使用中和抗体来对抗入侵的抗原。

然而，在实践中，为了诊断，医师常常面对区分急性、潜伏性或既往感染或与此相关的感染性疾病的问题。区分刚刚发生的(急性或活性)感染与潜伏性或慢性或既往感染是评估例如感染或疾病患者是否仍然是感染性的关键。

为了区分感染各阶段或与此相关的继发疾病，感染剂或要素的直接检测原则上提供了其本身。然而，一方面此处存在分离感染因子的困难。另一方面，分离的感染因子必须借助于适宜的培养方法被培养，这样正确的检测才成为可能。这通常需要高成本和花费时间，而且不是对于所有病原体都能够实施。

对于间接形式的感染检测，理论上对抗感染因子形成的抗体也是合适的。然而，此处的弊端在于，即使在感染痊愈后数年在病人血液中通常仍可检测到抗体。考虑到这些，在这种情况下也不可能区分急性、潜在性或痊愈感染。然而，可能对于下面的治疗措施，若从诊断的角度可作出关于感染状态(急性、潜伏或痊愈)的判断是可取的。

因此本发明的目的是提供一种有效可靠的用于体外诊断和/或体外治疗监测、特别是用于区分感染状况的方法。

利用具有独立权利要求1的特征的方法可实现依照本发明的该目的。该方法的优选实施方案是从属权利要求2-9的主题。进一步地，本申请还涉及依据独立权利要求10和11的方法的应用。这些应用的优选实施方案是从属权利要求12的主题。本发明的另一方面涉及具有独立权利要求13的特征的试剂盒。

依据本发明的方法是一种用于体外诊断和/或体外监测感染和/或感染性疾病的方法，特别是用于区分急性感染或感染性疾病和潜伏性或痊愈感染或感染性疾病的方法，其中使用抗原优选在研究表面或载体上培养真核细胞，并检测其分泌抗原特异性抗体的细胞(ASC)，这些细胞分泌的抗体是特异性地针对该抗原的。

换言之，依据本发明的方法是一种用于诊断和/或治疗监测感染和/或感染性疾病的方法，特别是用于区分急性感染或感染性疾病和潜伏性或痊愈感染或感染性疾病的体外方法，其中使用抗原优选在研究表面或载体上培养真核细胞，并检测其分泌抗原特异性抗体的细胞(ASC)，这些细胞分泌的抗体是特异性地针对该抗原的。

通过本发明，能够利用一种体外方法，特别地该方法允许急性(活性)感染和潜伏性(慢性)或痊愈感染的区分。为了这个目标，在依照本发明的方法的过程中，在ASC存在下研究真核细胞，这些细胞分泌的抗体可以是针对用于真核细胞培养的抗原的。借助于本发明方法检测的ASC通常为效应细胞，特别是效应B细胞。这种特异的细胞类型允许实现急性(活性)感染和潜伏性(慢性)或痊愈感染之间的区分。如果这些真核细胞检测ASC为阳性，那么这些真核细胞来源于罹患有关抗原的急性感染的人或动物体，或任选地甚至也来源于他们的一种既往感染疾病。另一方面，如果没有检测到ASC，则所检测的真核细胞一般来源于要么罹患该抗原相关的潜伏性感染，特别是已经持续数月的感染，要么从医学观点的角度确认为健康的人或动物体。健康的人或动物体被理解意指感染已经痊愈或在任何时间都未受到感染的机体。

通常，真核细胞来源于人和/或动物样品。优选地，真核细胞来源于体液样品，特别是血液样品、子宫颈涂片和/或支气管灌洗液。

在一个优选的实施方案中，在培养之前富集真核细胞，特别是发生于真核细胞中的免疫活性细胞‘免疫细胞’。真核细胞优选是血液细胞，特别是B淋巴细胞、T淋巴细胞、粒细胞、树突细胞、巨噬细胞和/或红细胞。为了富集真核细胞，通常使用的细胞浓缩技术均适用。因此例如可以通过离心，特别是梯度离心，来富集真核细胞。在梯度离心中，例如，可使用糖梯度。优选地，在培养前将真核细胞从红细胞中游离出来。在一个可能的实施方案中，发生于真核细胞中的ASC被富集。