[发明专利]防止病毒与DLC8结合的新型抗病毒肽无效
申请号: | 200880112912.0 | 申请日: | 2008-10-20 |
公开(公告)号: | CN101835795A | 公开(公告)日: | 2010-09-15 |
发明(设计)人: | 科瓦东加·阿隆索马蒂;布鲁诺·艾尔奈斯德拉普拉萨;何塞·安赫尔·马丁内斯埃斯克里瓦诺 | 申请(专利权)人: | 西班牙食品与饮料技术国家研究所;交替基因表达有限公司 |
主分类号: | C07K14/01 | 分类号: | C07K14/01 |
代理公司: | 中科专利商标代理有限责任公司 11021 | 代理人: | 吴小明 |
地址: | 西班牙*** | 国省代码: | 西班牙;ES |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 防止 病毒 dlc8 结合 新型 抗病毒 | ||
1.抗病毒组合物,其包括属于由SEQ ID NO:14或由其衍生的在至少一个氨基酸处具有保守变化且能够结合DLC8蛋白的任意序列表示的家族的肽。
2.根据权利要求1的抗病毒组合物,其包括属于由SEQ ID NO:1或由其衍生的在至少一个氨基酸处具有保守变化且能够结合DLC8蛋白的任意序列表示的家族的肽。
3.根据权利要求1或2的抗病毒组合物,其特征在于所述肽还包含增加所述肽内在化到细胞中的工具。
4.根据权利要求3的抗病毒组合物,其中将所述肽内在化到细胞中的所述工具由8个精氨酸的尾部组成。
5.根据权利要求1-4中任一项的抗病毒组合物,其中所述肽选自:SEQ ID NO:3,SEQ ID NO:6,SEQ ID NO:7,SEQ ID NO:8或SEQ ID NO:9。
6.根据权利要求1的抗病毒组合物,其中所述肽是SEQ ID NO:2。
7.根据权利要求1-6中任一项的抗病毒组合物,其还包括另一种活性化合物和/或任意药用载体、赋形剂、媒介物或稀释剂。
8.根据前述权利要求中任一项的抗病毒组合物,其有效用于治疗归因于选自下列各项的病毒感染:ASFV,人乳头瘤病毒,腺病毒,昆虫痘病毒A.moorei,痘苗病毒,呼吸道合胞病毒,人柯萨奇病毒,狂犬病毒,人单纯疱疹病毒,Mokola病毒或AIDS病毒。
9.属于由SEQ ID NO:14或SEQ ID NO:1或由其衍生的在至少一个氨基酸处具有保守变化且能够结合DLC8蛋白的任意序列表示的家族的肽,其缀合至可检测的荧光标记上或任何常用的标记上,所述标记允许优选利用二级抗体、荧光标记和生色团检测其。
10.根据权利要求9的肽,其选自:SEQ ID NO:7,SEQ ID NO:8和SEQ ID NO:9。
11.抗病毒化合物的选择及其功效评估的方法,其特征在于所述方法包括:
a)将细胞培养物用能够结合DLC8的化合物、其部分序列或通过保守置换序列的至少一个氨基酸产生的能够结合DLC8的类似序列或其部分序列预先温育或预先混合;
b)将病毒与在步骤a)预先温育或混合的细胞培养物接触;
c)在一定时间后检测并定量细胞内病毒感染的水平;
d)通过不同方法将所述病毒感染水平与在没有与能够结合DLC8的化合物预先温育或预先混合的感染该病毒的细胞培养物中达到的病毒感染水平进行比较。
12.评估肽、特别是病毒来源的肽向细胞中内在化和细胞的细胞质运输的方法,其通过目前所有的任意方法,诸如用可追踪的标记直接标记属于由SEQ ID NO:14或SEQ ID NO:1表示的家族的一种肽,并且通过特异性测量由与所述肽结合的标记发射的信号、或间接地通过在二级抗体上的二级步骤标记检测。
13.研究细胞中的动力蛋白的细胞生物学和功能的方法,其通过用可追踪的标记来标记属于由SEQ ID NO:14或SEQ ID NO:1表示的家族的一种肽或对所述肽特异性的二级抗体,并且通过测量由与所述肽或与所述抗体结合的标记发射的信号来检测它而进行。
14.根据权利要求12或13任一项的方法,其中所述肽或所述抗体用荧光分子如萤光素、罗丹明或本领域已知的允许通过直接的荧光显微镜检测的任何其它荧光标记进行标记。
15.根据权利要求12或13任一项的方法,其中所述肽或所述抗体用任意非荧光标记如生物素、血细胞凝集素、c-myc或GST标记。
16.根据权利要求12-15中任一项的方法,其中所述肽选自:SEQ IDNO:7,SEQ ID NO:8和SEQ ID NO:9。
17.选择抗病毒化合物和评估其抗病毒功效的方法,其特征在于包括:
a)获得单独的DLC8蛋白的RMN光谱作为对照光谱;
b)用病毒蛋白预先温育DLC8足够的时间,以允许病毒蛋白和DLC8之间的相互作用,随后获得结合所述病毒蛋白的DLC8的RMN光谱;
c)首先用抗病毒化合物预先温育DLC8足够的时间,以允许抗病毒-DLC8相互作用,随后加入病毒蛋白,温育足够时间,以允许DLC8-病毒蛋白相互作用,然后,获得DLC8光谱;
d)将步骤c)中获得的光谱与步骤a)或b)中获得的那些进行比较,在步骤c)中获得的光谱与步骤a)的对照光谱越相似,检测到越大功效的干扰结合活性。
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