[发明专利]筛选RAGE-淀粉状蛋白β肽相互作用抑制物质的方法无效

专利信息
申请号: 200880111808.X 申请日: 2008-10-15
公开(公告)号: CN101828115A 公开(公告)日: 2010-09-08
发明(设计)人: 墨仁姬;孙成敏 申请(专利权)人: 首尔国立大学校产学协力财团
主分类号: G01N33/68 分类号: G01N33/68
代理公司: 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 代理人: 赵蓉民;陆惠中
地址: 韩*** 国省代码: 韩国;KR
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摘要:
搜索关键词: 筛选 rage 淀粉 蛋白 相互作用 抑制 物质 方法
【权利要求书】:

1.筛选RAGE-淀粉状蛋白β肽相互作用抑制物质的方法,其包括:

a)制备RAGE-表达细胞系;

b)在Transwell板的上室中以形成细胞间紧密连接的方式培养所述细胞系;

c)向所述Transwell板的上室中加入淀粉状蛋白β肽和用于抑制RAGE-淀粉状蛋白β肽相互作用的候选物;和

d)比较所述Transwell板的下室中淀粉状蛋白β肽的浓度与当没有使用候选物时在所述下室中获得的淀粉状蛋白β肽浓度。

2.根据权利要求1的方法,其中所述细胞系是小鼠脑微血管内皮细胞(bEND.3)。

3.根据权利要求1的方法,其中所述RAGE是人RAGE。

4.根据权利要求1的方法,其中所述淀粉状蛋白β肽用荧光物质进行标记。

5.根据权利要求4的方法,其中所述荧光物质是荧光素酶。

6.筛选RAGE-淀粉状蛋白β肽抑制物质的系统,其包括RAGE-表达细胞系,其在Traswell板中以形成细胞间紧密连接的方式进行培养。

7.根据权利要求6的系统,其中所述细胞系是bEND.3。

8.根据权利要求6的系统,其中所述RAGE是人RAGE。

9.筛选针对RAGE-淀粉状蛋白β肽相互作用的拮抗剂的方法,其包括使淀粉状蛋白β肽和抑制RAGE-淀粉状蛋白β肽相互作用的候选物与用分别携带RAGE和NFκB的重组表达载体共转染的细胞系接触,和测量NFκB的表达模式。

10.根据权利要求9的方法,其中所述携带NFκB的重组表达载体包括在靠近NFκB基因的位置处的荧光素酶基因。

11.根据权利要求9的方法,其中所述细胞系是CHO(中国仓鼠卵巢)细胞系。

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