[发明专利]筛选RAGE-淀粉状蛋白β肽相互作用抑制物质的方法无效
| 申请号: | 200880111808.X | 申请日: | 2008-10-15 |
| 公开(公告)号: | CN101828115A | 公开(公告)日: | 2010-09-08 |
| 发明(设计)人: | 墨仁姬;孙成敏 | 申请(专利权)人: | 首尔国立大学校产学协力财团 |
| 主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68 |
| 代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 赵蓉民;陆惠中 |
| 地址: | 韩*** | 国省代码: | 韩国;KR |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 筛选 rage 淀粉 蛋白 相互作用 抑制 物质 方法 | ||
1.筛选RAGE-淀粉状蛋白β肽相互作用抑制物质的方法,其包括:
a)制备RAGE-表达细胞系;
b)在Transwell板的上室中以形成细胞间紧密连接的方式培养所述细胞系;
c)向所述Transwell板的上室中加入淀粉状蛋白β肽和用于抑制RAGE-淀粉状蛋白β肽相互作用的候选物;和
d)比较所述Transwell板的下室中淀粉状蛋白β肽的浓度与当没有使用候选物时在所述下室中获得的淀粉状蛋白β肽浓度。
2.根据权利要求1的方法,其中所述细胞系是小鼠脑微血管内皮细胞(bEND.3)。
3.根据权利要求1的方法,其中所述RAGE是人RAGE。
4.根据权利要求1的方法,其中所述淀粉状蛋白β肽用荧光物质进行标记。
5.根据权利要求4的方法,其中所述荧光物质是荧光素酶。
6.筛选RAGE-淀粉状蛋白β肽抑制物质的系统,其包括RAGE-表达细胞系,其在Traswell板中以形成细胞间紧密连接的方式进行培养。
7.根据权利要求6的系统,其中所述细胞系是bEND.3。
8.根据权利要求6的系统,其中所述RAGE是人RAGE。
9.筛选针对RAGE-淀粉状蛋白β肽相互作用的拮抗剂的方法,其包括使淀粉状蛋白β肽和抑制RAGE-淀粉状蛋白β肽相互作用的候选物与用分别携带RAGE和NFκB的重组表达载体共转染的细胞系接触,和测量NFκB的表达模式。
10.根据权利要求9的方法,其中所述携带NFκB的重组表达载体包括在靠近NFκB基因的位置处的荧光素酶基因。
11.根据权利要求9的方法,其中所述细胞系是CHO(中国仓鼠卵巢)细胞系。
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