[发明专利]亚硝酸盐含量降低的植物的产生

权利要求书

1.一种产生转基因植物的方法，其包括向未修饰的植物中引入编码亚硝酸还原酶的外源基因，其中该外源基因编码的亚硝酸还原酶的表达相对于未修饰的植物降低了该转基因植物中的亚硝酸盐含量。

2.权利要求1的方法，其中所述未修饰的植物为茄科。

3.权利要求2的方法，其中所述未修饰的植物为Cestoideae亚科。

4.权利要求3的方法，其中所述未修饰的植物为烟草属。

5.权利要求4的方法，其中所述未修饰的植物为烟草。

6.任一项前述权利要求的方法，其中所述外源基因为编码来源自与未修饰植物不同物种的亚硝酸还原酶的异源基因。

7.任一项前述权利要求的方法，其中所述外源基因来源自拟南芥属供体植物。

8.权利要求7的方法，其中所述外源基因来源自拟南芥菜。

9.权利要求8的方法，其中所述外源基因包含SEQ ID NO：2定义的核酸序列，或其编码功能性亚硝酸还原酶的片段，或其编码与SEQ ID NO：3定义的多肽具有至少90％氨基酸序列同一性的功能性亚硝酸还原酶的变异体。

10.权利要求1至6任一项的方法，其中所述外源基因包含编码亚硝酸还原酶的SEQ ID NOs：18，20，22，24，28，28，30或32中任一定义的核酸序列，或其编码功能性亚硝酸还原酶的片段，或其编码与SEQ ID NOs：19，21，23，25，27，29，31或33中任一定义的多肽具有至少90％氨基酸序列同一性的功能性亚硝酸还原酶的变异体。

11.任一项前述权利要求的方法，其中由所述外源基因编码的亚硝酸还原酶与未修饰植物中内源基因编码的亚硝酸还原酶具有小于90％的氨基酸序列同一性。

12.任一项前述权利要求的方法，其中所述编码亚硝酸还原酶的外源基因与能够引导该外源基因在该植物中组成型表达的启动子序列相连。

13.权利要求12的方法，其中所述启动子序列为来源自香石竹蚀环病毒的组成型启动子。

14.任一项前述权利要求的方法，其中通过引入外源基因生成第一代转基因植物，从第一代转基因植物产生第二代转基因植物。

15.权利要求14的方法，其中所述第二代转基因植物由第一代转基因植物自体受精产生。

16.权利要求15的方法，其中所述第二代转基因植物对于所述编码亚硝酸还原酶的外源基因是纯合的。

17.任一项前述权利要求的方法，其中通过引入外源基因生成的第一代转基因植物包含该外源基因的单个拷贝。

18.任一项前述权利要求的方法，其中由所述外源基因编码的亚硝酸还原酶在所述转基因植物的叶中表达。

19.任一项前述权利要求的方法，其中所述转基因植物的亚硝酸盐含量相对于未修饰植物降低了至少10％。

20.任一项前述权利要求的方法，其中通过用外源基因独立转化复数个未修饰植物生成复数个转基因植物。

21.权利要求20的方法，其进一步包括测定各转基因植物或它们后代的亚硝酸盐含量。

22.权利要求21的方法，其进一步包括选择一个或更多个相对于未修饰植物亚硝酸盐含量降低的转基因植物，并繁殖所述亚硝酸盐含量降低的转基因植物。

23.一种转基因植物，其包含编码亚硝酸还原酶的外源基因，其中相对于未修饰植物所述植物中的亚硝酸盐含量降低。

24.权利要求23的转基因植物，所述植物为茄科。

25.权利要求24的转基因植物，所述植物为Cestoideae亚科。

26.权利要求25的转基因植物，所述植物为烟草属。

27.权利要求26的转基因植物，所述植物为烟草。

28.权利要求23至27中任一项的转基因植物，其中所述外源基因包含编码来源自不同物种的亚硝酸还原酶的异源基因。