[发明专利]用于制备抗真菌病原体的植物的多核苷酸和方法

权利要求书

1.分离的多核苷酸，其包含选自下列的多核苷酸：

(a)在与编码SEQ ID NO：3的第二核苷酸序列在植物中共表达时，编码能够赋予或增强对毛盘孢属的抗性的多肽的核苷酸序列，其中所述多肽的氨基酸序列当基于Needleman-Wunsch比对算法与SEQ ID NO：246相比较时，具有至少75％同一性；

(b)(a)的核苷酸序列的互补体，其中所述互补体和该核苷酸序列由相同数目的核苷酸组成，且100％互补；和

(c)在与编码SEQ ID NO：3的第二核苷酸序列在植物中共表达时，编码赋予或增强对毛盘孢属的抗性的多肽的核苷酸序列，其中所述多肽的氨基酸序列当基于Needleman-Wunsch比对算法与保藏为专利保藏号NRRL B-50050的质粒的序列相比较时，具有至少75％同一性。

2.权利要求1的多核苷酸，其中基于Needleman-Wunsch比对算法，所述多肽的氨基酸序列和SEQ ID NO：246的氨基酸序列具有至少90％同一性。

3.权利要求1的多核苷酸，其中基于Needleman-Wunsch比对算法，所述多肽的氨基酸序列和SEQ ID NO：246的氨基酸序列具有至少95％同一性。

4.权利要求1的多核苷酸，其中所述核苷酸序列包含SEQ ID NO：245。

5.权利要求1的多核苷酸，其中所述核苷酸序列包含保藏为专利保藏号NRRL B-50050的质粒的序列。

6.载体，其包含权利要求1的多核苷酸。

7.重组DNA构建体，其包含可操作地连接到至少一个调节序列上的权利要求1的多核苷酸。

8.权利要求7的重组DNA构建体，其还包含第二多核苷酸，所述多核苷酸编码列于SEQ ID NO：3的Rcg1肽。

9.转化宿主细胞的方法，其包含用选自下列的至少一种多核苷酸转化宿主细胞：

(a)SEQ ID NO：245；和

(b)SEQ ID NO：2和245。

10.权利要求9的方法，其中所述宿主细胞是植物细胞。

11.权利要求10的方法，其中所述植物细胞来自玉米。

12.植物细胞，其包含权利要求7或权利要求8的重组DNA构建体。

13.生成植物的方法，其包含用权利要求7或权利要求8的重组DNA构建体转化植物细胞，和

从转化的植物细胞再生植物。

14.植物，其包含权利要求7或权利要求8的重组DNA构建体。

15.权利要求14的植物，其中所述植物是玉米。

16.种子，其包含权利要求7或权利要求8的重组DNA构建体。

17.权利要求16的种子，其中所述种子是玉米种子。

18.赋予或增强对毛盘孢属的抗性的方法，其包含用权利要求7或权利要求8的重组DNA构建体转化植物，从而赋予或增强对毛盘孢属的抗性。

19.确定权利要求1的多核苷酸在玉米植物中存在或不存在的方法，其包含下述的至少一种：

(a)从所述玉米植物分离核酸分子，并扩增与权利要求1的多核苷酸同源的序列，或

(b)从所述玉米植物分离核酸分子，并进行DNA印迹杂交，或

(c)从所述玉米植物分离蛋白，并使用Rcg1b蛋白的抗体进行蛋白印迹，或

(d)从所述玉米植物分离蛋白，并使用Rcg1b蛋白的抗体进行ELISA测定，或

(e)证实从Rcg1b mRNA转录物衍生的、且Rcg1b基因特有的mRNA序列的存在，

从而确定权利要求1的多核苷酸在所述玉米植物中的存在。

20.改变植物细胞中复数种蛋白表达水平的方法，所述复数种蛋白能赋予对毛盘孢属的抗性，该方法包含：

(a)用权利要求8的重组DNA构建体转化植物细胞；和

(b)在适合表达重组DNA构建体的条件下，培养转化的植物细胞，其中重组DNA构建体的表达导致在转化的植物细胞中生成复数种改变水平的能赋予对毛盘孢属的抗性的蛋白。