[发明专利]选择蛋白酶抗性多肽的方法

权利要求书

1.从肽或多肽的集中选择蛋白酶抗性肽或多肽的方法，包括

提供肽或多肽的集；

在适合蛋白酶活性的条件下组合所述集和蛋白酶；以及

回收具有期望的生物学活性的肽或多肽，

从而选择蛋白酶抗性肽或多肽，

其中所述蛋白酶选自在痰、粘液(例如，胃粘液、鼻粘液、支气管粘液)、支气管肺泡灌洗液、肺匀浆、肺提取物、胰提取物、胃液、唾液或泪液中存在的蛋白酶。

2.从肽或多肽的集中选择蛋白酶抗性肽或多肽的方法，包括

提供肽或多肽的集；

在适合蛋白酶活性的条件下组合所述集和蛋白酶；以及

回收具有期望的生物学活性的肽或多肽，

从而选择蛋白酶抗性肽或多肽，

其中所述条件是(i)约10μg/ml到约3mg/ml蛋白酶，(ii)约20℃到约40℃和(iii)至少约30分钟。

3.权利要求2的方法，其中所述条件(i)是约10到约100μg/ml蛋白酶。

4.权利要求2或3的方法，其中所述条件(ii)是约30到约37℃。

5.权利要求2到4的任一项的方法，其中所述条件(iii)是至少约一小时。

6.权利要求2到5的任一项的方法，其中所述蛋白酶选自在痰、粘液(例如，胃粘液、鼻粘液、支气管粘液)、支气管肺泡灌洗液、肺匀浆、肺提取物、胰提取物、胃液、唾液或泪液中存在的蛋白酶。

7.前述任一项权利要求的方法，其中所述蛋白酶包含以下的一种或更多种：丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、巯基蛋白酶、基质金属蛋白酶、羧肽酶(例如，羧肽酶A、羧肽酶B)、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、弹性蛋白酶、leucozyme、胰酶、凝血酶、纤维蛋白溶酶、组织蛋白酶(例如，组织蛋白酶G)、蛋白水解酶(例如，蛋白水解酶1、蛋白水解酶2、蛋白水解酶3)、嗜热菌蛋白酶、凝乳酶、肠肽酶、胱天蛋白酶(例如，胱天蛋白酶1、胱天蛋白酶2、胱天蛋白酶4、胱天蛋白酶5、胱天蛋白酶9、胱天蛋白酶12、胱天蛋白酶13)、钙激活中性蛋白酶、无花果蛋白酶、梭菌蛋白酶、actinidain、菠萝蛋白酶和separase。

8.前述任一项权利要求的方法，其中所述蛋白酶是胰蛋白酶或弹性蛋白酶。

9.前述任一项权利要求的方法，其中所述蛋白酶是由生物学提取物、生物学匀浆或生物制品提供的。

10.权利要求9的方法，其中所述生物学提取物、生物学匀浆或生物制品选自由痰、粘液(例如，胃粘液、鼻粘液、支气管粘液)、支气管肺泡灌洗液、肺匀浆、肺提取物、胰提取物、胃液、唾液和泪液构成的组。

11.前述任一项权利要求的方法，其中所述期望的生物学活性是结合活性。

12.权利要求11的方法，其中所述结合活性是结合通用配体。

13.权利要求12的方法，其中所述通用配体是蛋白A、蛋白G或蛋白L。

14.权利要求11的方法，其中所述结合活性是特异性结合目标配体。