[发明专利]降低基质效应的装置和方法

说明书

本申请要求2007年5月16日提交的美国专利申请号11/803,824的优先权。

发明领域

本发明总体上涉及制备分析测试用的生物分析样品的装置和方法。

发明背景

生物分析测试(bioanalytical testing)和定量测定方法受到污染物的干扰，所述污染物能降低或增加对样品中各种分析物的灵敏度，而这种灵敏度的增加或降低与分析物的丰度不成比例。液相色谱-质谱法/质谱法(LC/MS-MS)是药物代谢研究的优选方法；然而，基质效应(matrix effect)可导致明显的分析误差，应该研究该效应以确保精确度、选择性和灵敏度不受损。(Little，J.L等，(2006)J.Chromatog.833，219)。具体地说，磷脂，例如磷脂酰胆碱通过降低分析物灵敏度而干扰电喷雾MS检测中的分析物电离，通常称为离子抑制或基质效应。参见Ahnoff，M.和Hagelin，H.“电喷雾电离中的基质效应：血浆磷脂作为电离效率的阻遏剂/增强剂的表征”(Matrix Effects inElectrospray Ionization：Characterization of Plasma Phospholipids asSuppressors/Enhancers of Ionization Efficiency)，在美国质谱学协会(American Society for Mass Spectrometry)第52届质谱学大会(52^ndConference on Mass Spectrometry)上作出，(2004))。各种动物种类的不同样品，例如血浆中脂质组成不同可改变分析物的响应并对定量测定造成问题使得该问题更加复杂。这些基质效应的其它讨论见以下报道：Bennett等，报道了磷脂污染生物分析样品可导致校正曲线偏离和保留时间偏移：“生物分析中磷脂基质效应的控制”(Managing Phospholipid-Based Matrix Effectsin Bioanalysis)，www.tandemlabs.com/capabilities_publications.html(入口2-26-07)；“强保留的磷脂和邻苯二甲酸二辛酯的电离抑制作用是不精确度的原因”(A Source of Imprecision Resulting from Ionization Suppression fromStrongly Retained Phospholipids and Dioctyl Phthalate)，在美国质谱学协会第52届质谱学大会上作出，(2004))。

此外，存在污染物可导致溶剂提取不完全，因此会低估分析物的浓度，或者其可在分析仪器上累积、破坏灵敏度或在进行清洗流程时导致故障。污染物，例如磷脂会在沉淀血浆样品的反复分析期间累积在典型的反相HPLC柱上。累积的磷脂会在随后的注射中冲下(bleed off)，从而在多次注射期间可导致分析物灵敏度漂移。参见Bennett和Liang，“在定量LC/MS/MS中通过选择性提取克服生物学磷脂导致的基质效应”(Overcoming Matrix Effects Resulting fromBiological Phospholipids Through Selective Extractions in QuantitativeLC/MS/MS)，在美国质谱学协会第52届质谱学大会上作出，(2004)。除去磷脂需用大量溶剂清洗以将柱再生至合适条件。