[发明专利]用于表达肠产毒性大肠杆菌定居因子(CF)抗原的杂合操纵子

权利要求书

1.一种包括基因组装体的重组操纵子，其中存在编码与肠产毒性大肠 杆菌细菌(ETEC)有关的定居因子抗原(CF)的至少两个主要亚基的至少两个 结构基因。

2.一种被遗传工程化以包括权利要求1所述重组操纵子的宿主细胞， 其中所述操纵子位于附加型元件上或被整合到所述宿主细胞的染色体中。

3.如权利要求1或2所述的宿主细胞，其中所述附加型元件是质粒。

4.如权利要求2或3所述的宿主细胞，其中所述定居因子抗原(CF)的 至少两个主要亚基是相同或不同的。

5.如权利要求2-4中任意一项所述的宿主细胞，其中CF选自CFA/I， CS1，CS2，CS4，CS14，CS17，CS19和假定的定居因子O71(PCFO71)组成的 组。

6.如权利要求2-5中任意一项所述的宿主细胞，其中所述细胞表达CF 的至少两个主要亚基。

7.如权利要求2-6中任意一项所述的宿主细胞，其中所述宿主细胞是 选自细菌和单细胞真核生物组成的组中的活微生物。

8.如权利要求7所述的宿主细胞，其中所述宿主细胞是大肠杆菌细胞。

9.如权利要求8所述的宿主细胞，其中所述大肠杆菌细胞是非产毒性 大肠杆菌细胞。

10.如权利要求2-9中任意一项所述的宿主细胞，其中所述细胞不表达 抗生素抗性基因。

11.如权利要求2-10中任意一项所述的宿主细胞，其中所述宿主细胞 载有一种或多种可由一种或多种质粒互补的可互补染色体缺失或突变。

12.一种产生能够表达与肠产毒性大肠杆菌细菌(ETEC)有关的定居因 子抗原(CF)的至少两个主要亚基的宿主细胞的方法，所述方法包括以下步 骤：

将表达杂合ETEC CF需要的基因或基因片段和控制所述亚基表达的 ETEC启动子组装入操纵子；将操纵子整合入宿主细胞的基因组或用包括所 述操纵子、用于质粒维持的选择性标记和复制起点的质粒转化宿主细胞。

13.一种抗腹泻疫苗组合物，包括至少一种如权利要求2-11中任意一 项所述的宿主细胞以及药学上可接受的赋形剂、缓冲剂和/或稀释剂。

14.如权利要求13所述的疫苗，其中所述药学上可接受的赋形剂、缓 冲剂和/或稀释剂被选择用于疫苗的口服递送。

15.如权利要求1所述的操纵子在生产疫苗中的用途。