[发明专利]幼稚白细胞的分析用试剂及分析用试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及一种用于对从生物体采集的试样中的白细胞进 行分类并计数的试剂及试剂盒。

背景技术

血细胞在骨髓中产生，由未成熟细胞分化、成熟后移动到 末梢血液。对于健康的人，末梢血液中不会出现未成熟白细胞(幼稚白 细胞)。另一方面，白血病、癌的骨髓转移、多发性骨髓瘤、重症感染 症等患者的末梢血液中有时出现幼稚白细胞。因此，将生物试样中的 成熟白细胞及幼稚白细胞分类并进行测定在这些疾病的诊断中具有非 常重要的意义。

作为用于测定幼稚白细胞的试剂，已知日本特开平 10-206423号(专利文献1)中公开的试剂。将混合该试剂和生物试样而 得的测定试样导入流式细胞仪，照射特定波长的光，基于得到的光学 信息，对检测体中的成熟白细胞和幼稚白细胞进行分类，并分别计数。 另外，还可以将幼稚白细胞细分为原粒细胞、幼稚粒细胞等，并分别 计数。 专利文献1：日本特开平10-206423号公报

发明内容

发明要解决的技术问题

在使用现有试剂的血细胞分析中，例如，使用流式细胞仪 测定血细胞时，溶血的红细胞碎片(红细胞影)的信号区域和原粒细胞 的信号区域部分重叠。如果使用这样的试剂，则即使是分析不含有原 粒细胞的血液试样的情况，也会将红细胞碎片的信号误认为是原粒细 胞的信号，不能得到正确的血细胞分析结果。例如在患有多发性骨髓 瘤、胆管癌、腹膜炎、糖尿病、肾小球肾炎、胸膜炎等特定疾病的患 者的末梢血液中不含有原粒细胞。但是，如果使用所述现有的试剂对 从这些患者采集的末梢血液的血细胞进行分类，则有时在散点图的原 粒细胞的信号检测区域中检测出信号。出现这种情况的原因被认为可 能是：来自所述特定患者的试样中所含的红细胞与健康的人及所述疾 病以外的疾病患者的试样中的红细胞不同，不能顺利地溶血。如果在 末梢血液中检测出比实际量多的原粒细胞，则可能不能进行正确的诊 断及治疗。需要说明的是，在本说明书中，所谓“红细胞影”，是指 血液试样与血液分析用试剂反应而丧失血红素、但没有充分收缩的红 细胞。

因此，本发明的课题在于提供一种试剂，其中，即使为从 所述特定疾病的患者采集的血液试样，也可以更准确地进行幼稚白细 胞的分类及计数。

解决问题的技术方案

为了解决这些问题，本发明人等进行了反复研究，结果发 现，通过使幼稚白细胞的分析用试剂的渗透压比现有程度更低，可以 解决上述课题。

现有幼稚白细胞的分析用试剂，为了防止幼稚白细胞及成 熟白细胞在测定时溶解，认为优选使用具有和这些血细胞相同程度的 渗透压的幼稚白细胞的分析用试剂。 但是，此次发现，将从患有多发性骨髓瘤、胆管癌、腹膜炎、糖 尿病、肾小球肾炎、胸膜炎等特定疾病的患者采集的生物试样进行分 析时，如果使用在现有的技术常识下未考虑的低渗透压的分析用试剂， 则来自这些特定患者的生物试样的分析的精度进一步提高。例如，通 过使用低渗透压的分析用试剂，可以更明确地区分原粒细胞和溶血的 红细胞。另外，令人惊讶的是，即使是从患有所述特定疾病之外的疾 病的患者采集的生物试样，使用本发明的分析用试剂时，也和渗透压 高的现有试剂一样，可以明确区分幼稚白细胞和成熟白细胞。例如， 可知，通过使用本发明的分析用试剂，可以防止红细胞影的出现。 即使使用低渗透压的分析用试剂，根据检测体的不同，有时原粒 细胞的信号和嗜碱性粒细胞的信号也重叠地被检测出来。因此，即使 在健康人的末梢血液中未出现原粒细胞，有时也会被当做出现了原粒 细胞，从而不能进行正确的检查。针对原粒细胞的信号和嗜碱性粒细 胞的信号重叠这个更深一层的问题，可以通过使幼稚白细胞的分析用 试剂的表面活性剂、助溶剂的浓度比现有程度更低的方式进行解决。 即，即使是含有较多嗜碱性粒细胞的血液试样，通过使用本发明的试 剂，可以更明确地区分嗜碱性粒细胞和原粒细胞。另外，通过降低表 面活性剂、助溶剂的浓度，在低渗透压下也可以将成熟白细胞分为至 少3类。

本发明的一方面提供一种幼稚白细胞的分析用试剂，其中， 包含损伤红细胞及成熟白细胞的细胞膜的表面活性剂、使受损血细胞 收缩的助溶剂及核酸染色色素，且渗透压为10mOsm/kg以上且小于 150mOsm/kg。