[发明专利]皮内流感疫苗

说明书

发明领域

本发明涉及药物领域，尤其是传染性疾病领域。更具体地，本发明 涉及包括病毒体的疫苗用于制备预防性治疗流感感染的药物。

发明背景

流感病毒(正粘病毒科家族的成员)是每年流行性急性呼吸道疾病 的病原体。流感流行和大范围流行仍然在剥夺人类生命并影响全球经济。 仅在美国每年就有5000万美国人患上流感。据估算全世界每年死亡人数 (1972-1992)是60,000(CDC统计值)。除了季节性流行外，在上世纪存在三 次主要的流感大范围爆发。严重的流感大流行的典型例子是1918-1919年 的“西班牙流感”，据估算其在全球范围内杀死4000-5000万人。其他的大流 行发生在1957年(亚洲流感，据估算100万人死亡)和1968年(香港流感， 据估算700,000人死亡)。现在已经发现(致命)禽流感病毒可以进入人群， 很清楚在某些情况下这种禽类病毒或其致命组分的人与人之间的传播实际 上是可能的。

流感病毒的感染与许多疾病和并发症有关，所述疾病和并发症导致 实质上世界范围的发病和死亡，尤其是在老年人和慢性病患者中。抗流感 的疫苗接种能够最有效的预防与该感染有关的通常致死性的并发症，在流 感疫苗的开发方面已经做出了许多努力。

目前使用三种类型的灭活流感疫苗：全病毒，裂解产物和表面抗原 或亚单位疫苗。季节性疫苗都包含流感病毒株的表面糖蛋白血凝素(HA)和 神经氨酸酶(NA)，所述流感病毒株被预期来年在人群中传播。所述递送掺 入疫苗的HA和NA蛋白的毒株在含胚鸡蛋中生长，随后纯化病毒颗粒， 然后进一步处理。

每年都需要调整流感疫苗，这归因于称为“抗原性漂移”和“抗原性转 变”的过程引起的抗原变异：由于病毒HA或NA蛋白中一系列导致氨基酸 取代的点突变的积聚发生抗原性漂移。这些取代阻止了先前感染诱导的中 和抗体的结合，新的变体从而能够感染宿主。抗原性转变是通过动物(通 常是禽类)和人甲型流感病毒之间的基因重排出现的新亚型。1957年(H2N2) 和1968年(H3N2)的大流行毒株是重排病毒的实例，通过所述病毒禽类HA 和/或NA编码基因被引入循环人类病毒，随后可以在人群间传播。

基于世界范围内上百个国家流感中心的流行病学调查，世界卫生组 织(WHO)每年推荐流感疫苗的成分，通常针对北半球的是在二月，针对南 半球的是在九月。这一措施将疫苗生产和标准化时间窗限制到最多9个月。

在紧急需要许多剂量的疫苗的情况下，例如当一种新的甲型流感病 毒亚型通过抗原性转变和抗原性漂移出现，并且疫苗的供给增加是必需的 时候，鸡蛋的有限可用性可能阻碍疫苗的快速生产。该生产系统的其他缺 点在于缺乏灵活性，毒素存在的风险和外来病毒的风险(尤其是逆转录病 毒)和无菌度的担心。一些毒株在鸡蛋中比其他毒株生长更快，这可能阻 碍这类疫苗最终被递送的速度。总之，这些缺点是当今利用这类含胚鸡蛋 生产流感疫苗所面临的严重问题。因此使用细胞培养系统用于针对流行及 大流行病的流感疫苗生产是有吸引力和可靠的生产替代方法。WO 01/38362 公开了使用腺病毒E1转化和永生化细胞系进行流感病毒生产。

每年流感疫苗通常包含来自2种甲型流感病毒株和1种乙型流感株 的抗原。通过单辐射免疫扩散分析，标准的0.5ml可注射剂量通常含15μg 来自每种毒株的血凝素(HA)抗原组分，加起来总共大约45μgHA。

由于世界人口增加，经济增长和繁荣，国际旅游加强，每年流感流 行病的传播加快，世界范围流感大流行病的威胁以及全世界可用生产设施 的局限性，希望使用性能比目前所用标准品提高的疫苗在人类中实现保护 性免疫应答；还希望使用更低剂量的疫苗(为了节约剂量)同时获得类似 水平的保护性免疫。但是，当考虑更低剂量时，可以考虑免疫刺激剂如基 于铝的佐剂。但是，由于不良副作用如注射部位的疼痛，在流感疫苗中通 常不使用铝。

附图简述

图1显示18到60岁的接种者中肌内递送(IM)或皮内递送(ID)后，对 于A/New Caladenia株(左侧条)，A/广岛株(中间条)和B/马来西亚株(右侧条) 的(A)血清转变(SC)率(％)，(B)GMT倍数增长标准(＞2.5倍)，和(C)血清保护 (SP)率(＞70％)。