[发明专利]赭曲霉毒素的固相萃取

说明书

技术领域

本发明涉及一种适于结合赭曲霉毒素的聚合物。该聚合物可用于 赭曲霉毒素的固相萃取和将赭曲霉毒素固定在固相萃取(SPE)盒中， 以对从食品提取的液体中的赭曲霉毒素进行定性或定量的分析。

背景技术

人类食品和动物饲料种类繁多，包括食用坚果、油籽、谷物和饲 料，从它们中衍生的产品容易受到霉菌毒素污染，所述霉菌毒素是真菌 的有毒代谢的副产品，这可以在食品和饲料作物被收获之前和之后发生

赭曲霉毒素A是由一些曲霉的物种和由青霉菌孢产生的赭曲霉毒 素化合物的结构相关官能团中最重要和最常见的，上述曲霉例如是主要 在热带地区的A.赭曲霉，所述青霉菌孢是在温带地区如加拿大、东欧 、西欧、北欧和南美洲部分地区常见的存储真菌。欧盟最近提出了一项 关于赭曲霉毒素A的最高含量的法令，在包括大米和荞麦的谷物原料中 是5μg/kg，在谷物衍生产品或供人类直接消费的谷物产品中是3μg/kg ，且在干葡萄果实中是10μg/kg。因此对赭曲霉毒素水平的直接测定是 食品和饲料的质量控制中的重要方面。

对霉菌毒素含量的测量通常使用高效液相色谱法(HPLC)进行。 然而，在高效液相色谱设备无法使用或不适于使用的情况下，通过薄层 色谱法(TLC)来测定也是可行的。在TLC分离后，用发射波长366纳 米的汞灯作为光源以激发荧光，该荧光用光电倍增管检测和量化，这样 可以使用商用扫描仪进行霉菌毒素测量。对于定量检测，还有放射免疫 检定技术和以免疫化学为基础的技术，如酶联免疫吸附测定(ELISA) 方法。

从食品样品中提取的溶液在例如使用HPLC定量测定之前，可使 用固相萃取对该溶液进行“清理”工序，以去除可能会干扰霉菌毒素的 评估的化合物。

可以使用小型色谱柱(称为“微型柱”，mini-column)进行霉菌 毒素的定量检测，其中在微型柱的矿物吸附剂内霉菌毒素被固定为一 层。在紫外线光下观察微型柱，被固定的霉菌毒素会产生荧光。多种微 型柱方法已经被采纳成为AOAC国际(官方分析化学家协会Association of Official Analytical Communities)的正式测试。

WO 2006/123189描述了一种对固定在微型柱的层中的霉菌毒素进 行定量荧光测定的装置，并且还提到了分子印迹聚合物和非分子印迹 (空白)聚合物作为SPE盒中霉菌毒素吸附剂的用途。

WO 2003/101580公开了一种用于将霉菌毒素与固体载体结合的方 法，其中包括利用霉菌毒素作为模板来制备分子印迹聚合物(MIP)。 从所提到的霉菌毒素和功能单体的大批清单中，实际制备的一些MIP仅 使用霉菌毒素脱氧萎镰菌醇(DON)和玉米赤霉烯酮(ZON)作为模 板。对于DON的MIP是以二乙基氨乙基-甲基丙烯酸甲酯 (DEAMA)、4-乙烯基吡啶(4-VP)或甲基丙烯酸(MAA)与作为交 联剂的乙二醇-甲基丙烯酸酯(EDMA)或二乙烯基苯(DVP)聚合而 成。对于ZON的MIP是用EDMA作为交联剂以三氟甲基丙烯酸 (TFM)或4-VP聚合得到的。

WO 2006/120381公开了一种包括用于结合麻醉异丙酚的分子印迹 聚合物的传感器。该聚合物由从N，N-二乙基氨乙基甲基丙烯酸酯 (DEAEM)、丙烯酰胺、2～(三氟甲基)丙烯酸(TFMAA)、衣康 酸和甲基丙烯酸磷酸乙二醇酯(EGMP)中的一种或多种所选择的一种 单体和交联剂组成。在聚合过程中异丙酚用作模板以达到预期的分子印 迹。

发明内容

本发明的目的是提供一种可用作对于赭曲霉毒素有选择性的SPE 吸附剂的聚合物。

本发明是基于以下发现：含有氨基或氨基-烷基基团和酸性基团的 聚合物在用作SPE吸附剂时能够固定赭曲霉毒素。

因此，本发明的一个方面提供了一种含有氨基或氨基-烷基基团和 酸性基团的聚合物，它用作SPE吸附剂以固定赭曲霉毒素。

如果这种聚合物本身是新颖的，它们也形成本发明的另一个方面。

用于本发明的聚合物可通过常规聚合技术制备，不使用赭曲霉毒素 或结构类似物作为模板(template)。所述聚合物优选被制备为大孔性 的(macroporous)，例如通过在聚合过程中使用致孔剂形成。