[发明专利]软骨中间层蛋白2 C1及其区分骨关节炎与类风湿性关节炎及非疾病状态的用途

说明书

发明领域

本发明涉及帮助评估骨关节炎(OA)的方法。所述方法特别地用于评估骨关节炎的不存在或存在。所述方法例如通过分析生物化学标志物来实现，包括测量样品中人类软骨中间层蛋白2(CILP-2)在体液中的浓度，以及将所测定的浓度与骨关节炎的不存在或存在相关联。更具体地，本发明涉及软骨中间层蛋白2C1的N-末端部分或其片段。本发明还描述了开发用于区分骨关节炎与类风湿性关节炎(RA)及非疾病状态的诊断和预测性分析法。

背景技术

关节炎是一类影响身体关节健康的病症，包括类风湿性关节炎和银屑病性关节炎，它们是自体免疫疾病；由关节感染引起的脓毒性关节炎；以及更常见的骨关节炎。不同于自体免疫疾病，骨关节炎主要影响老年人，并引起关节软骨的退化。

骨关节炎是影响大部分人的最常见的关节炎形式。虽然骨关节炎可能影响几乎任何关节，它最常见地影响手、膝盖、臀部和脊柱。共同症状包括疼痛、僵硬、关节活动的丧失、以及受影响关节的形状的改变。它常被称为退化性关节病或“磨损性”关节炎。虽然它可能突然由外伤导致，它的发作一般是逐步的；老化导致软骨中的分解，疼痛逐渐变得更为严重，虽然在早期阶段它可以通过休养来减轻。隐隐的、抽动性的夜间疼痛是特征性的，它可能伴随着肌无力或退化。症状通常在50岁以后出现并慢慢地进展。从关节疼痛开始，所述状况发展，最后关节变得变形，限制运动。随着软骨分解，留下暴露的骨骼使步态改变。疾病的晚期显示了具有炎症的成分，其中在软骨中的过程可能在刺激这种炎症中起作用。所述状况被认为由关节上过度的或不正常的负荷引起，已知的是，过重、不良姿势、劳作的重复性应力、损伤、运动损伤或这些因素的组合提高了风险。

骨关节炎还包括组织结构的新的产生，特别明显的是在所谓的骨赘的形式中，骨赘是通过软骨内骨形成所形成的新的结构。虽然机械因素看起来在疾病起始和发展中起到作用，但关于具体的事件所知很少，部分是由于缺少可以鉴定疾病的早期的诊断操作。患者通常在疾病发展的晚期由于疼痛和关节功能失常来寻求治疗，此时软骨破坏已经明显地发生。

当今，没有单独的病征、症状或测试结果容许确定性地诊断骨关节炎。相反，诊断基于几种因素的考虑，包括骨关节炎的特征性体征和症状的存在、实验室测试和X光的结果、美国风湿病学学会(ACR)设定的指标。

放射照相通常可以确认骨关节炎的诊断，然而这种发现是非特异性的。疾病的主要放射照相特征是关节间隙的丧失和新的骨形成或骨赘的存在。骨关节炎的关节疼痛和放射照相特征之间的相关性不是非常紧密的，从而即使具有这种疾病的病理性证据或放射照相证据的关节可能仍然是无症状的。利用放射照相术来描绘OA中软骨破坏水平的另一个缺点是，特别是对于膝盖，X射线的精确角度对于正确测量关节间隙是必需的。在损伤发生几年之后才能使用X射线诊断，而生物标志物如软骨中间层蛋白2 C1和其片段可以早得多地用于适当的诊断。

不清楚的是骨关节炎的渐进性组织破坏中的基础性过程是什么，但是存在着由增高的蛋白质分解活性引起的主要组织大分子的分解的明确事件。已经显示的是，这种渐进性组织破坏中的早期事件是软骨蛋白聚糖(aggrecan，一种作为软骨的主要结构成分的蛋白多糖)的降解，沿着该分子的五个特异性位点可以被所谓的软骨蛋白聚糖酶(ADAMTS-4和5)裂解。然而，正常水平的软骨蛋白聚糖适合于，例如，在一过程中软骨上改变的机械载荷，所述过程涉及分子在典型位点和被相同的ADAMTS酶的裂解。存在着由特异性胶原酶和降解主要分子如软骨寡聚基质蛋白质(COMP)的其他酶所实现的胶原蛋白的片段化。

在骨关节炎的过程中，生产的某些片段不再保留在组织中，被释放到周围体液中，并最终可以到达循环。新的技术基于测量体液中的这些片段，作为导致组织破坏的活动过程的指标。这种分子标志物技术提供了新的诊断操作的可能性。与当前使用的方法所可能的相比，这些方法具有潜力检测组织破坏中更早得多的事件。已经观察到的是，当释放到滑液中的循环COMP片段的提高水平最终到达血液时，它们可以用作由X射线成像观察到的、导致关节软骨破坏的过程的预测性指标。虽然骨关节炎和类风湿性关节炎的疾病中的过程是不同的，看起来在两种情况下血清COMP水平都具有预测价值。