[发明专利]一种柿叶黄酮提取物及其制备方法

说明书

(一)技术领域：

本发明涉及一种柿叶黄酮提取物及其制备方法，属于药用活性成分的提取技术领域。

(二)背景技术：

柿叶中的主要有效成分是黄酮，目前已发现的柿叶黄酮化合物有黄芪甙、异槲皮素、山奈酚、槲皮素、山奈酚-3-o-β-D-葡萄糖甙、山奈酚-3-o-α-L-鼠李糖甙、山奈酚-3-β-D-木糖甙、山奈酚-3-o-α-L-阿拉伯糖甙、槲皮素-3-o-[2″-o-(3、4、5-三羟基苯甲酰)]-葡萄糖甙、芦丁、金丝桃甙、杨梅树皮甙、紫云英甙等。国内外研究表明，柿叶黄酮具有降血压、抑菌、降血脂、降低胆固醇、止血、活血化瘀、抑制肿瘤生长等功能，并有促进植物生长的作用。

柿叶中的黄酮主要以甙类形式存在，采用不同的提取方法所得黄酮的成分以及含量高低均存在较大差异。目前公开文献已报道的柿叶黄酮的提取工艺主要有以下几种：(1)用15倍柿叶重的50％乙醇水溶液，在75℃下浸提3小时；此方法仅得到粗提取物，黄酮含量只有15％左右。(2)采用水煮提取，加碱类物质助溶，过滤，滤液上吸附树脂层析，然后洗脱，收集洗脱液；该方法得到的也是粗提取物，虽然具有降血压功能及促进植物生长的活性，但杂质仍较多，无法作为人体药用成分。(3)CN1709542A公开了双水相萃取提取柿叶黄酮类物质的方法，先加入乙醇溶液固液浸取，粗提液进行双水相萃取，然后用乙酸酯类反萃，蒸馏，干燥即可；但该方法所得产品中黄酮类化合物的含量也只有12.1％左右。(4)CN1546014A和CN101194921A公开的柿叶黄酮提取物的制备方法为：水煮，过滤，醇沉，乙酸乙酯萃取，大孔树脂吸附，乙醇洗脱，回收乙醇得浓缩物，干燥即可；所得提取物含总黄酮为60-90％。但该方法的流程较为繁琐，提取效果依然不够理想。

(三)发明内容：

本发明所要解决的技术问题是：利用改进的工艺方法从柿叶中提取黄酮类物质，其工艺流程简单，生产成本低，提取物中黄酮类物质含量高。

本发明的技术方案：柿叶黄酮提取物的制备方法为：将柿叶破碎，用低碳醇提取1～3次，每次5～180min，合并提取液，回收低碳醇、浓缩，离心，上清液过大孔树脂柱进行纯化，先用水再用低碳醇洗柱，收集醇洗脱液；洗脱液经浓缩、回收低碳醇后，用有机试剂萃取2～5次，萃取液浓缩，干燥，即得柿叶黄酮提取物。所用的柿叶原料可以是新鲜或干燥的。

更具体的制备方法为：将柿叶破碎，用3～8倍重量的低碳醇提取1～3次，每次5～180min，合并提取液，回收低碳醇、浓缩至提取液体积的1/25～1/6倍，离心，上清液过大孔树脂柱进行纯化，先用去离子水洗柱2～3h，再用低碳醇洗柱至洗脱液澄清、透明，收集醇洗脱液(为树脂重量的1～3倍)；洗脱液浓缩至10～15波美度，回收低碳醇后，用浓缩液体积3～10倍的有机试剂萃取2～5次，萃取液浓缩，喷雾干燥，即得柿叶黄酮提取物。

上述制备方法中，所述的低碳醇为甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、戊醇或异丙醇，其体积浓度为25％～100％。

所述提取方式为加热提取、超声提取或微波提取。加热提取时，提取温度为50～95℃，提取时间为每次1～3小时；超声波提取时，工作频率15～80KHz，提取时间为每次5～120min；微波提取时，工作频率900～2500MHz，提取时间为每次5～120min。

提取液和洗脱液浓缩时均采用真空浓缩，浓缩温度50～70℃，真空度0.06～0.1MPa；萃取液浓缩时采用真空浓缩，浓缩温度30～50℃，真空度为0.06～0.1MPa。

提取液离心时采用管式离心，转速为18000r/min。

大孔树脂柱纯化时，液体流速为0.5～1.5BV/h。

所述的大孔树脂柱是以聚苯乙烯为骨架的D101型、D130型、AB-8型、HP-20型或ADS-7型大孔吸附树脂。申请人经过筛选实验发现，这几种大孔吸附树脂对柿叶中黄酮类化合物的纯化效果更好，而且其价格便宜，可以多次重复使用，成本较低。

萃取用的有机试剂为乙酸乙酯、正丁醇或正丙醇。

以上所述柿叶黄酮提取物的制备方法制备得到的柿叶黄酮提取物。