[发明专利]一种HPLC法分析分离盐酸普拉克索光学异构体的方法

说明书

技术领域

本发明属涉及一种高效液相色谱法，尤其是一种分析分离盐酸普拉克索及其光学异构体的高效液相色谱法。

背景技术

盐酸普拉克索为一种抗帕金森症新药，其分子式为C₁₀H₁₇N₃S·2HCl，化学名为(S)-2-氨基-4，5，6，7-四氢-6-(正丙氨基)苯并噻唑二盐酸盐，结构式为

该分子中含1个手性碳原子，在通过定向合成目标化合物盐酸普拉克索的过程中需要控制其光学异构体的含量。

对于盐酸普拉克索的光学异构体杂质，在药物合成过程当中是需要进行质量控制的。含手性碳原子的光学异构体的分离一直是手性药物合成和制剂过程中质量控制的难点，实现盐酸普拉克索及其光学异构体的分离在盐酸普拉克索药物的合成和制剂过程的质量控制方面具有现实意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种分析分离盐酸普拉克索及其光学异构体杂质的高效液相色谱方法，从而实现盐酸普拉克索与其光学异构体杂质的分离测定。

申请人发现，以纤维素类手性柱，以加入一定比例胺的正相混合溶剂为流动相，可以将盐酸普拉克索及其光学异构体进行有效分离，从而可以准确控制盐酸普拉克索的质量。本发明的方法能简单、快速、准确地分析分离盐酸普拉克索及其光学异构体杂质。

进一步地，选用纤维素类手性柱AD-H(Daicel，250mm×4.6mm，5μm)，可以获得更好的分析分离效果。

进一步地，本发明的正相溶剂选用正己烷和无水乙醇的混合溶剂。

本发明的方法中的流动相选用体积比为70∶30～90∶10正己烷和无水乙醇的混合溶剂。

本发明的方法中的流动相中的胺选用二乙胺。

本发明所述的分析分离方法，可按照以下方法实现：

(1)取盐酸普拉克索样品适量，用无水乙醇溶解样品，配制成每1ml含盐酸普拉克索0.1mg～0.5mg的样品溶液。

(2)设置流动相流速为0.4～1.2ml/min，检测波长为262nm，色谱柱柱温箱为20-25℃，色谱柱柱温的最佳温度为20℃。

(3)取(1)的样品溶液2-50μl注入液相色谱仪，完成盐酸普拉克索及其光学异构体的分析与分离。

其中：

高效液相色谱仪：岛津：LC-10ATvp，SPD-M10Avp，SCL-10Avp，DGU-12A；

色谱柱：AD-H(Daicel，4.6mm×250mm，5μm)纤维素手性色谱柱；

流动相：正己烷-无水乙醇-二乙胺＝80∶20∶0.2；

检测波长：262nm；

流速：1.0ml/min；

进样体积：10μl。

本发明采用纤维素类AD-H(Daicel，4.6mm×250mm，5μm)手性色谱柱，能够有效的分析分离盐酸普拉克索及其光学异构体(杂质)；选择流动相溶解样品，确保了溶液的稳定性；选择进样体积10μl，柱温为室温，提高了色谱峰的对称性。本发明解决了含盐酸普拉克索及其光学异构体的原料及制剂的分析与分离问题，从而确保了盐酸普拉克索及其制剂的质量可控。

附图说明

图1实施例1，正己烷-无水乙醇-二乙胺＝80∶20∶0.2，柱温10℃的HPLC图；

图2实施例2，正己烷-无水乙醇-二乙胺＝80∶20∶0.4，柱温10℃的HPLC图；

图3实施例3，正己烷-无水乙醇-二乙胺＝70∶30∶0.2，柱温12℃的HPLC图；

具体实施方式：

实施例1

仪器与条件

高效液相色谱仪：岛津：LC-10ATvp，SPD-M10Avp，SCL-10Avp，DGU-12A；

色谱柱：AD-H(Daicel，4.6mm×250mm，5μm)；

流动相：正己烷-无水乙醇-二乙胺＝80∶20∶0.1；

流速：1.0ml/min；

进样体积：10μl；

检测波长：262nm；

实验步骤

分别称取盐酸普拉克索及其光学异构体各5mg，置于25ml容量瓶中，加无水乙醇溶解并稀释置刻度，摇匀，作为混合样品溶液。并分别称取盐酸普拉克索及其光学异构体各5mg，分别置于2个25ml容量瓶中，加无水乙醇溶解并稀释置刻度，摇匀，作为定性对照溶液。