[发明专利]肌酐诊断/测定试剂(盒)及肌酐浓度测定方法

权利要求书

1.一种利用酶比色法及酶联法技术的肌酐浓度测定方法，其方法如下：

肌酐+水肌酐脱亚胺酶N-甲基海因+氨

氨+2水+6高铁细胞色素c亚硝酸还原酶/Ca²⁺亚硝酸+

6亚铁细胞色素c

亚硝酸+3还原型辅酶亚硝酸还原酶氢氧化铵+3辅酶+水

将最终反应物置于紫外/可见光分析仪或半、全自动生化分析仪下，检测主波长340nm吸光度下降的程度，测算出肌酐的浓度大小测定结果。

2.一种肌酐诊断/测定试剂(盒)，主要成分包括：

缓冲液                  20——500mmol/L

稳定剂                  1——4000mmol/L

还原型辅酶              0.1——0.35mmol/L

肌酐脱亚胺酶            1000——80000U/L

亚硝酸还原酶            1000——80000U/L

亚硝酸还原酶            1000——80000U/L

高铁细胞色素C           1——50mmol/L

氯化钙                  1——50mmol/L

试剂成分的浓度不一定只限于上述范围；在此范围内效果较好，在此范围外，试剂仍会反应作用。钙离子是亚硝酸还原酶(EC 1.7.2.2)的激活剂，因此氯化钙可用其它钙盐取代。

其特征在于：试剂(盒)可以是干粉状态，在使用前加水溶解后使用；也可以配制成液体试剂，直接使用。

3.根据权利要求2所述肌酐诊断/测定试剂(盒)，其特征在于：

由缓冲液、稳定剂、还原型辅酶、肌酐脱亚胺酶、二个不同的亚硝酸还原酶、高铁细胞色素C、氯化钙组成单剂试剂。

4.根据权利要求2所述肌酐诊断/测定试剂(盒)，其特征在于：

由缓冲液、稳定剂、还原型辅酶、肌酐脱亚胺酶、二个不同的亚硝酸还原酶、高铁细胞色素C、氯化钙组成双剂试剂；试剂1，由缓冲液、稳定剂、还原型辅酶、高铁细胞色素C、氯化钙组成；试剂2，由缓冲液、稳定剂、肌酐脱亚胺酶、二个不同的亚硝酸还原酶组成。还原型辅酶、肌酐脱亚胺酶、二个不同的亚硝酸还原酶、高铁细胞色素C、氯化钙在试剂1或试剂2中的位置可以不限。

5.根据权利要求2所述肌酐诊断/测定试剂(盒)，其特征在于：

由缓冲液、稳定剂、还原型辅酶、肌酐脱亚胺酶、二个不同的亚硝酸还原酶、高铁细胞色素C、氯化钙组成多剂试剂；试剂1，由缓冲液、稳定剂、还原型辅酶、高铁细胞色素C、氯化钙组成；试剂2，由缓冲液、稳定剂、二个不同的亚硝酸还原酶组成；试剂3，由缓冲液、稳定剂、肌酐脱亚胺酶组成。还原型辅酶、肌酐脱亚胺酶、二个不同的亚硝酸还原酶、高铁细胞色素C、氯化钙在试剂1、试剂2或试剂3中的位置可以不限。

6.根据权利要求2所述肌酐诊断/测定试剂(盒)，其特征在于：还包括稳定剂1-4000mmol/L或0.1％-100％体积比。所述稳定剂为：甘油(Glycerol)、丙二醇(Propylene Glycol)、乙二醇(Ethylene glycol)及防腐剂中的至少一种。