[发明专利]一种产L-乳酸的菌株及用该菌同步糖化发酵菊芋生产L-乳酸的方法

权利要求书

1、一种产L-乳酸的菌株，其分类命名为酪乳酸菌(Lactobacillus sp.)G-02，巳保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 208232。

2、用权利要求1所述菌株同步糖化发酵菊芋生产L-乳酸的方法，其特征是使用具备较高菊粉酶活力的黑曲霉SL-09，在发酵进行12h后，接入酪酪乳酸菌G-02，然后采用同步糖化与发酵的工艺，步骤为：

(1)菊芋粉的制备：

将新鲜菊芋根茎洗净、切片，40℃通风干燥48h，风干的菊芋片采用粉碎机打磨，细粉过50目筛；干粉含总糖量为56％；

(2)酪乳酸菌种子的制备：

酪乳酸菌种子培养基组成以g/L计为：葡萄糖30，蛋白胨10，酵母膏10，(NH₄)₂HPO₄，2，MnSO₄·H₂O 0.2，CaCO₃，20，初始pH 7.0；将一环酪乳酸菌G-02种子接入100mL灭菌的培养基中，30℃、140r/min一级摇瓶培养18h后，将6只一级培养液分别接入6只装有3L培养基的5L平底圆烧瓶中，继续二级培养30h；

(3)黑曲霉的产酶：

产酶培养基组成以g/L计为：菊芋粉50，豆饼粉40，蔗糖酯6；

将黑曲霉株SL-09接入装有20L产酶培养基的50L发酵罐中，30℃、通风量0.8L/min、转速140r/min，在发酵进行12h后接入酪乳酸菌，即将所得6只二级培养液接入，产酶进程中无需调节pH，总培养时间60h后，产菊粉酶内切酶和外切酶分别达到275.6U/ml和571.8U/mL，所得菊粉酶液用于产L-乳酸；

(4)同步糖化与发酵产L-乳酸：

由步骤(3)所得菊粉酶液加水、加底物菊芋粉组成发酵液，同步糖化与发酵菊芋生产乳酸的菊粉酶接种量和酶活分别为35％和50U/mL，在发酵的开始、12h和24h时，分别将40Kg、25Kg和25Kg的菊芋粉加入400L发酵液中，发酵温度30℃，总发酵时间36h后发酵终止，乳酸浓度为120.5g/L，转化率为理论转化率的94.5％。