[发明专利]一种防治烟草赤星病的球孢链霉菌菌剂及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物农药，更具体地说，本发明涉及一种防治烟草赤星病 的菌剂及其制备方法。

背景技术

烟草是我国重要的叶用经济作物，是病害危害最严重的作物之一，从播 种到收获，整个过程都可受到病原物的侵染。烟草赤星病(Tobacco Brown Spot Disease)是烟叶成熟后期重要的叶部病害，在各烟区普遍发生，是我国 烟草的主要病害。近年来，我国的湖南、安徽、贵州、云南、陕西、辽宁、 浙江、广东、福建、黑龙江、吉林等省的赤星病也有所发展，成为为害最大 的一种叶斑病，一般年份发病率为20％～30％，严重的发病率达90％、减少 产值达50％以上，对产量、质量影响较大。

烟草赤星病是一种典型的气传病害，目前国内在防治时主要以保健栽培 等农业措施和大剂量的化学农药等防治措施，缺乏可供区域栽培的抗性品 种；多年使用菌核净进行防治，导致用药成本在逐年攀升，防治效果在逐步 减弱，一些病原真菌已产生抗药性，防治难度也随之加大。

由于化学药剂极易形成药害，施药时也易受雨水的冲刷而失效，而且缺 乏高效低毒化学防治药剂，连续用药易造成农药残留，对环境造成的恶劣影 响，污染水源，造成人畜中毒、死亡，同时也使病原菌产生抗药性，致使其 使用受到一定限制。另一方面，烟草赤星病是烟草成熟期病害，由于对烟草 安全性的要求越来越高，对烟草栽培本身来说，就提出了更高的要求，特别 是对于烟草赤星病这种成熟期病害的防治不大适宜采用有残留的化学药剂。 这是本领域一个急待解决的技术难题。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的不足之处，提供一种有效、无毒、安 全、无残留、使用简便的防治烟草赤星病的菌剂。同时，本发明还提供一 种所述菌剂的制备方法。

本发明的目的通过下述技术方案予以实现。

A.本发明提供了一种防治烟草赤星病的菌剂，该菌剂采用的放线菌是 分类命名为球孢链霉菌(Streptomyces globisporus)AM6，保藏编号为 CGMCC No.1701。

本发明的生产菌株球孢链霉菌(Streptomyces globisporus)AM6，分 离自云南蒙自典型的烟草赤星病病斑上，室内离体叶片悬滴法测定发现100 倍带菌培养液对赤星病的防效均达100％，平皿测定发现AM6 100倍带菌 培养液对强致病力病菌的抑制作用为100％，其灭菌滤液的抑制效果为 81.8％，其抑菌机理主要是产生拮抗物质，显微镜观察表明AM6能使病菌 孢子和菌丝畸变，细胞壁破裂，原生质泄露。该菌株具有以下特征：

①在高氏一号琼脂和天门冬素琼脂上28℃培养7～10天后，菌株AM6 基内菌丝无横隔，不断裂，无孢囊；气生菌丝分枝较多；孢子丝直或弯曲， 偶丛生；孢子球形或卵圆形，表面光滑。在8种培养基上生长的结果见表1。

表1.菌株AM6在8种培养基上的培养特征

②全细胞水解液含有LL-二氨基庚二酸(LL-DAP， LL-Diaminopimelicacid)，甘氨酸，糖无特征性(糖型C)；含有磷脂酰乙醇 胺(PE)，磷酸类脂为II型。

③具有以下生理生化特性：氨酸酶阴性，可在纤维素上生长，产生类黑 色素，不产生H₂S，液化明胶，胨化牛奶，不凝固牛奶，水解淀粉，还原硝 酸盐，利用L-阿拉伯糖、L-鼠李糖、D-葡萄糖、D-甘露糖、D-果糖、D-木 糖、半乳糖，不利用甘露糖、棉籽糖、肌醇。

B.本发明提供了球孢链霉菌(Streptomyces globisporus)AM6生物制剂 的制备方法，该法采用以下步骤：

1.试管种培养

试管斜面培养基配方为：新鲜马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂17-20g， 蒸馏水1000ml，pH自然。

将球孢链霉菌(Streptomyces globisporus)AM6划线接种到试管斜面培 养基上，在28℃±1℃恒温培养4～5天，获得试管种。

2.液体发酵培养

液体发酵培养基配方为：黄豆粉10.0g，蔗糖20.0g，磷酸氢二钾2g、 硫酸亚铁0.02g、碳酸钙0.5g、硫酸镁0.05g、自来水1000ml、pH自 然。