[发明专利]一种发酵培养桦褐孔菌的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种发酵培养桦褐孔菌的方法。

背景技术

桦褐孔菌(Inonotus obliquus)属担子菌亚门、层菌纲、非褐菌目、多孔菌 科、褐卧孔菌属的一种药用真菌，寄生于桦树的树干上，子实体小，黑色块状，不 孕。野外采集到的通常是菌丝体形成的黑色瘤状物，是该真菌的药用部分。桦褐孔 菌主要分布于俄罗斯北部、北欧、日本(北海道)以及我国的长白山和大兴安岭等 北纬40°-50°的地区(黄年来.俄罗斯神秘的民间药用真菌—桦褐孔菌.中国食 用菌，2002，21：7.)。桦褐孔菌在俄罗斯、北欧、日本、美国及韩国被广泛用来 治疗恶性肿瘤(Glowacki，Tomaszewski J.Attempted therapy of inoperable cancer of the female genitalia with Inonotus obliquus.Extract Ginekol Pol. 1962，33：445.)、糖尿病、心血管疾病、肝病(Wasser SP，Weis AL.Therapeutic effect of substances occurring in higher basidiomycetes mushrooms：a modern perspective.Critical Review of Immunology，1999，19：65.)及艾滋病(Sakuma K.Aids virus multiplication inhibitor and method of culturing active ingredient thereof.JP：93/159，946，1993-07-07.)等。对多种肿瘤细胞(乳 房癌、唇癌、胃癌、耳下腺癌、肺癌、皮肤癌、直肠癌和霍金斯淋巴癌)有明显的 抑制作用；能有效地防止癌细胞转移、复发，增强免疫能力并且可用于配合恶性肿 瘤患者的放疗、化疗，增强病人的耐受性，减轻毒副作用(Mizuno T，Zhuang C，Abe K，et al.Antitumor and hypoglycemic activities of polysaccharides from the sclerotia and mycelia of Inonotus obliquus(Pers.Fr.)Pil.International Journal of Mushrooms，1999，1：301-316.)。桦褐孔菌作为抗肿瘤天然药物在 俄罗斯已有一百多年的应用历史，是具有显著药理活性而对人体没有任何毒副作用 的药用真菌(林壁贤，李华，毛景华等，药用真菌桦褐孔菌.海峡药学，2004，16： 74.)。研究表明，芳香类(丹宁、黄酮)、地花菌素类、黑色素类等酚类化合物 构成桦褐孔菌的次生代谢产物的主体，具有抗氧化、诱导肿瘤细胞调亡等重要药理 活性，是桦褐孔菌抗氧化、抗肿瘤活性的有效成分(何坚，冯孝章.桦褐孔菌化学 成分的研究.中草药，2001，32：4.Babitskaya VG，Scherba VV，Ilonnikova NV， et al.Melanin complex from medicinal mushroom Inonotus obliquus(Pers.： Fr.)Pilat(Chaga)(Aphyllophoromycetideae).International Journal of Medicinal Mushrooms，2001，4：139-145.Cui Y，Kim DS，Park KC.Antioxidant effect of Inono tus obliquus.Journal of Ethnopharmacology，2005，96：79-85. Park，Y.K.，Lee，H.B.，Jeon，E.J.，Jung，H.S.，Kang，M.H.，2004.Chaga mushroom extract inhibits oxidative DNA damage in human lymphocytes as assessed by comet assy.BioFactors 21：109-112.Burczyk J，Gawron A， Slotwinska M et al..Anitmitotic activity of aqueous extracts of Inonotus obliquus.Bollettino Chimico Farmaceutico，1996，135：306-309.)。由于桦 褐孔菌分布于高寒地区，生长极为缓慢。有研究表明，生长在活桦树的野生桦褐孔 菌10-15年才具有较好的药用价值(陈艳秋，李玉.桦褐孔菌的研究进展.微生物通 报，2005，32：124-127.)。因此野生桦褐孔菌资源已远远不能满足日益增长的市 场需求。野生桦褐孔菌生长在高海拔的寒冷地区，昼夜温差大。冬季受高强紫外线 照射，夏季受病原微生物和昆虫的入侵。病原菌感染、紫外辐射以及昆虫吞噬压力 诱导酚类化合物合成代谢关键酶基因的启动，表达诸如查耳酮合成酶和酪氨酸酶， 从而在菌体内积累大量的酚类化合物(如黄酮类和黑色素等植物防御素)以平衡生 存的环境压力。因此，酚类化合物的大量积累是桦褐孔菌在特定的环境压力下实现 的。由于人工培养环境缺少细菌和霉菌入侵以及昆虫吞噬的压力，导致桦褐孔菌酚 类化合物积累甚微，从而使人工培养的桦褐孔菌药理学活性大大下降(Zheng W， Zhao Y，Zhang M，Yin Z，Chen C，Wei Z.Phenolic compounds from Inonotus obliquus and their immune-stimulating effects.Mycosystema 2008，27： 39-47.)。