[发明专利]一种制备阿维菌素的方法及其专用菌株

说明书

技术领域

本发明涉及一种制备阿维菌素的方法及其专用菌株。

背景技术

阿维菌素是一种大环内酯类抗生素，具有广谱的抗线虫和肠道寄生虫的性质，是目前世界上最有前景的生物杀虫杀螨剂。阿维菌素的杀虫作用是通过释放神经传导抑制剂、使害虫缓慢麻痹致死来实现的，对宿主的副作用较低，在环境中无累积，对人、畜均具有安全性，所以阿维菌素在动物保健和农业生产方面有广泛的应用，具有广阔的市场发展前景。阿维菌素是由除虫链霉菌(Streptomyces avermitilis)生产的一组由十六元大环内酯与一个二糖(齐墩果糖)所构成的一类杀虫抗生素，共有4对8个同系物，即阿维菌素A1a/A1b、B1a/B1b、A2a/A2b、B2a/B2b。在这8个化合物中，以阿维菌素B1a活性最高。1999年，阿维菌素成为世界第21大畅销农药，第4大畅销杀虫剂，销售额高达1.6亿美元。以阿维菌素为母体，还可以开发出一系列活性更高、选择性更强、使用更加安全的衍生新品种，已商品化的品种包括伊维菌素、埃玛菌素、道拉菌素、埃珀利诺菌素和色拉菌素等。其中的伊维菌素是目前世界上销售量最大的兽药，1981年的年销售额就达到了10亿美元，创单项兽药销售收入最高；埃珀利诺菌素则被美国FDA认定为全程安全畜用驱虫剂。此外，近年来又有研究发现阿维菌素有抗肿瘤的功效，并且对肿瘤细胞的抗药性也有一定的抑制作用。阿维菌素具有不易产生抗药性、易降解和无残留的特点，使其成为高毒农药的最佳替代品。基于以上优点，阿维菌素在各个国家的需求不断上升。因此，需要提高阿维菌素的生产效率，以供应日益增长的需求。

发明内容

本发明的一个目的是提供一株阿维链霉菌，该菌株能高产阿维菌素。

本发明所提供的阿维链霉菌菌株为阿维链霉菌(Streptomyces avermitilis)ZLX6001，保藏编号为CGMCC No.2712。

阿维链霉菌菌株ZLX6001是好氧的革兰氏阳性嗜温放线菌，形成分枝状基生菌丝和长的紧密螺旋的气生菌丝。孢子链由15个或以上的表面光滑的圆形或卵形孢子构成。在燕麦培养基上形成灰色的气生孢子团，菌落背面黑褐色。在蛋白胨酵母提取物和铁培养基上产生黑色素。

该菌株已于2008年10月15日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址：北京市朝阳区大屯路，中国科学院微生物研究所，邮编100101)，保藏编号为CGMCC No.2712。

本发明的另一个目的是提供一种制备阿维菌素的方法。

本发明所提供的制备阿维菌素的方法，是发酵阿维链霉菌(Streptomycesavermitilis)ZLX6001，得到阿维菌素。

所述发酵的方法是将所述菌株接种于发酵培养基中，在温度为25-30℃的条件下培养。

其中，所述发酵培养基由终浓度为105-195g/L的玉米淀粉、终浓度为20-36g/L的豆粕粉、终浓度为6-12g/L的酵母粉、终浓度为0.175-0.325g/L的(NH₄)₂SO₄、终浓度为0.014-0.026g/L的CoCl₂、终浓度为0.015-0.028g/L的Na₂MoO₄、终浓度为0.0016-0.003g/L的MnSO₄、终浓度为2800-5200 U/L的淀粉酶和终浓度为0.6-1.0g/L的CaCO₃组成，余量为水；所述终浓度均为在所述发酵培养基中的浓度。

所述发酵培养基优选为如下培养基：由终浓度为150g/L的玉米淀粉、终浓度为28g/L的豆粕粉、终浓度为9g/L的酵母粉、终浓度为0.25g/L的(NH₄)₂SO₄、终浓度为0.02g/L的CoCl₂、终浓度为0.022g/L的Na₂MoO₄、终浓度为0.0023g/L的MnSO₄终浓度为4000U/L的淀粉酶和终浓度为0.8g/L的CaCO₃组成。

所述发酵可以在振荡的条件下进行，所述振荡的转速可以为200-250rpm，旋转半径为50mm。所述振荡的转速优选为220rpm。

为了防止发酵液因过多蒸发而浓缩，造成虚假的发酵单位，保持发酵过程中环境相对湿度为50-60％。

所述发酵的温度优选为28℃。