[发明专利]复合型硅壳结构的荧光纳米探针及其制备方法和应用

权利要求书

1、一种复合型硅壳结构的荧光纳米探针，其特征在于：是以复合型硅壳结构的荧光纳米粒子为基质材料，其表面偶联了生物分子；

所述复合型硅壳结构的荧光纳米粒子的外壳成分为二氧化硅，荧光内核是由纳米金及其表面包裹的罗丹明染料组成。

2、根据权利要求1所述的复合型硅壳结构的荧光纳米探针，其特征在于：所述纳米金的粒径为25±5nm，整个复合型硅壳结构的荧光纳米粒子的粒径为60±10nm。

3、根据权利要求1所述的复合型硅壳结构的荧光纳米探针，其特征在于：所述生物分子是小分子药物、氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸或核酸。

4、一种权利要求1所述复合型硅壳结构的荧光纳米探针的制备方法，其特征在于具体包括以下步骤：

(1)复合型硅壳结构的荧光纳米粒子的制备：

a.在纳米金溶液中，按纳米金与罗丹明染料的摩尔比为1:1-4加入罗丹明染料溶液，反应持续6-12h，得到包裹了染料的纳米金溶液，称为反应液；

b.在磁力搅拌下加入氨水到a.得到的反应液中，调节溶液的pH值在10-11之间；

c.向b.得到的反应液中按纳米金与正硅酸乙酯的摩尔比为1:1-6加入正硅酸乙酯的乙醇溶液，在磁力搅拌下反应12-24h，即可得到所述复合型硅壳结构的荧光纳米粒子；

(2)步骤(1)所得荧光纳米粒子的氨基化：在磁力搅拌下，将复合型硅壳结构的荧光纳米粒子和氨基丙基三甲氧基硅烷的乙醇溶液以摩尔比为100-500:1的比例反应12-24h，即可得到氨基化的复合型硅壳结构的荧光纳米粒子；

(3)连接生物分子：将氨基化的荧光纳米粒子与生物耦连剂以摩尔比为1-4:1的比例相混合，按1.0-10.0mg/ml的浓度再加入待连接的生物分子，在4℃下避光孵育6-12h；离心过滤，并将标记上生物分子的荧光纳米粒子重新分散在pH7.0-7.8的磷酸盐缓冲溶液中，即可到连接上生物分子的荧光纳米探针，于4℃以下贮存。

5、根据权利要求1所述的复合型硅壳结构的荧光纳米探针的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中，所述纳米金溶液的摩尔浓度为1.0×10^-6-5.0×10^-6mol/L；所述罗丹明染料溶液的摩尔浓度为5.0×10^-6-1.0×10^-5mol/L；所述正硅酸乙酯的乙醇溶液的摩尔浓度为1.0×10^-3-5.0×10^-3mol/L；所述纳米金的粒径为25±5nm；所述复合型硅壳结构的荧光纳米粒子的粒径为60±10nm。

6、根据权利要求1所述的复合型硅壳结构的荧光纳米探针的制备方法，其特征在于：所述步骤(2)中，所述氨基丙基三甲氧基硅烷的乙醇溶液的摩尔浓度为1.0×10^-3-5.0×10^-3mol/L，所述生物耦连剂是乙基3-(3-二甲氨基)碳二亚胺盐酸盐，其摩尔浓度范围是0.1-1.0mol/L。

7、权利要求1所述复合型硅壳结构的荧光纳米探针在生物标记和生物检测领域的应用。