[发明专利]微生态复合菌剂及微生态复合菌剂的制备方法

权利要求书

1.微生态复合菌剂的制备方法，其特征在于微生态复合菌剂按以下步骤进行制备：一、分别对纳豆芽孢杆菌、乳酸克鲁维酵母菌和嗜酸乳杆菌进行培养；二、扩大培养；三、将乳酸克鲁维酵母菌、嗜酸乳杆菌和纳豆芽孢杆菌分别转入相应的高菌浓度培养液继续培养至菌落浓度为1.0×10⁷～9.9×10⁹个/mL，然后在0～4℃、5000～10000r/min的条件下离心15～50min；四、将三种菌体离心沉淀物分别放入含有脱脂乳粉、海藻糖、甘油、蔗糖、谷氨酸钠的保护剂中，然后在-10～-70℃的环境中预冻10～24h，再在无菌条件下真空冷冻干燥，三种菌的冻干粉等质量混合后加入大豆低聚糖，即得到微生态复合菌剂；其中步骤四中大豆低聚糖的加入量占微生态复合菌剂总质量的10％～30％；步骤四中菌体离心沉淀物与保护剂的重量比为1～9∶10，保护剂中脱脂乳粉的质量浓度为10％、海藻糖的质量浓度为1％、甘油的质量浓度为1％、蔗糖的质量浓度为1％、谷氨酸钠的质量浓度为0.1％。

2.根据权利要求1所述的微生态复合菌剂的制备方法，其特征在于步骤一中嗜酸乳杆菌在25～40℃、100～180r/min的条件下用乳清培养基旋转或振荡培养24～72h；步骤一中乳酸克鲁维酵母菌在25～40℃、100～180r/min的条件下用乳清培养基旋转或振荡培养24～72h；步骤一中纳豆芽孢杆菌在25～40℃、100～180r/min的条件下用蔗糖肉胨液体培养基旋转或振荡培养24～72h。

3.根据权利要求2所述的微生态复合菌剂的制备方法，其特征在于用于培养嗜酸乳杆菌的乳清培养基按重量百分比由0.5％的酵母膏、0.03％的胱氨酸和余量的波美度为5°BX的麦芽汁组成，并调节pH值为6.8；用于培养乳酸克鲁维酵母菌的乳清培养基为波美糖度是10°BX的麦芽汁，调节pH值为6.8；用于培养纳豆芽孢杆菌的液体培养基按重量百分比由2.0％的麦芽糖、1.5％的大豆胰蛋白胨、0.2％的酵母膏、0.3％的K₂HPO₄、0.05％的MgSO₄.5H₂O、0.02％的CaCl₂.5H₂O和余量的蒸馏水组成，并调节pH值为7.0。

4.根据权利要求1所述的微生态复合菌剂的制备方法，其特征在于步骤三中嗜酸乳杆菌的高菌浓度培养液按重量百分比由10％的乳清粉、1％的葡萄糖、0.03％的胱氨酸和余量的双蒸馏水组成，并调节pH值为6.8；步骤三中乳酸克鲁维酵母菌的高菌浓度培养液按重量百分比由10％的乳清粉、1％的葡萄糖和余量的双蒸馏水组成，并调节pH值为6.8；步骤三中纳豆芽孢杆菌的高菌浓度培养液按重量百分比由1％的蛋白胨、1％的蔗糖、1％的牛肉浸膏、0.5％的NaCl和余量的蒸馏水组成，并调节pH值为6.8。