[发明专利]一种黄芩总黄酮苷元提取物、制备方法及应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种黄芩总黄酮苷元提取物，制备方法及应用，具体是黄芩所含主要苷元的制备，以及在抗肾纤维化中的应用，属于医药技术领域。 

背景技术

肾组织细胞代谢丰富，损害后容易发生组织缺氧与氧化应激损害。而氧化应激不仅可导致组织的脂质过氧化和炎性损伤，刺激促纤维化因子表达于肾小管上皮细胞转分化，从而导致肾纤维化；并通过激活NF-κB途径，进一步加重炎症损伤与纤维化。肾纤维化是各种慢性肾脏疾病发展到慢性肾衰竭等终末期肾病的共同通路，包括肾间质纤维化与肾小球硬化。其中肾间质纤维化是多种因素损伤肾小管上皮细胞后所致的肾脏常见病理变化，其进一步发展导致肾小球毛细血管狭窄、肾小管萎缩、肾功能损害。因此，氧化应激损伤在肾纤维化病理中有重要作用，提高组织的抗氧化能力，降低氧化应激可以减轻炎症和纤维化反应。 

我们既往的研究也表明在氯化汞可直接与GSH结合，减少与耗竭机体抗氧化能力，并发现该模型具有显著的肾组织脂质过氧化损伤、NF-κB信号途径活化与肌成纤维细胞活化等特点。虽然血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)制剂通过阻断RAS信号途径等显示有较好的抗肾纤维化效果，但是由于其发病机制复杂，涉及多细胞、细胞因子和介质的参与。信号分子途径之间可能相互影响，存在多条旁路途径，因而目前尚缺乏特异有效的肾纤维化治疗方法。 

中药具有多成分、多靶点、多途径的作用特点，在慢性纤维化疾病的治疗中显示了一定的优势。研究发现黄酮类化合物具有抗炎、抗氧化、抗变态、抗菌抗病毒等多方面的药理作用，近期报道黄芩及黄芩提取物具有抗肝、肺纤维化的作用。而现有技术中也提到黄芩提取物的制备方法，如中国发明专利(申请号：200510043709.0)提供了黄芩苷元的制备方法，即采用酶解黄芩，再用无水乙醇来提取。该方法存在很大的弊端，由于无水乙醇的极性相对较大，一些极性较小的苷，也同时会被提取出来，而这样提取物给出的药效实验结果，很难说清是苷或者是苷元的作用。也有人报道用微生物的酶，来酶解黄芩植物内的苷，该法与利用植物体内的酶相比，代价较高，而且由于使用了微生物的酶，可能会带入微 生物自身代谢产物，未来可能会给临床用药带来一定的隐患。 

发明内容

本发明的目的是，针对现有技术的不足，提供一种对黄芩根进行酶解后得到的总黄酮苷元提取物；本发明的另一个目的是提供该总黄酮苷元提取物的制备方法及应用。 

本发明的技术方案是：一种黄芩总黄酮苷元提取物，其中黄芩总黄酮苷元含量为45-70％，由黄芩素、汉黄芩素、千层纸素A及其他苷元组成。 

本发明的黄芩总黄酮苷元提取物的制备方法，是将黄芩根酶解后用乙酸乙酯提取。

本发明的黄芩总黄酮苷元提取物的制备方法，取黄芩根，粉碎，过1号筛；取粉末，加1-5倍量水搅拌均匀，在32-40℃保温酶解5-9小时，于60℃烘干，加2-8倍量乙酸乙酯，连续提取6-10小时，减压回收溶剂，真空干燥，即得总黄酮苷元提取物。 

本发明的黄芩总黄酮苷元提取物的最佳制备方法为取黄芩根粉末，加3倍量水，搅拌均匀，在36℃保温酶解9小时，于60℃烘干，加5倍量乙酸乙酯，连续提取8小时，减压回收溶剂，真空干燥，即得总黄酮苷元提取物。。 

黄芩总黄酮苷元实验结果：本发明的黄芩总黄酮苷元提取物，可以有效改善肾纤维化大鼠一般状况如体重、活动、饮食及精神状况，改善异常增加的肾脏体重比，减少尿蛋白，改善肾功能，明显减轻大鼠肾组织炎症，减轻肾组织基底膜与间质内胶原沉积，减少肾组织羟脯氨酸含量。表明黄芩提取物对不同病因导致的肾功能损伤均具有良好改善作用，并具有较好的抗肾间质的纤维化的作用。 

本发明的优点： 

1、制备方法能耗低、污染小、工艺简单、适合工业化生产； 

2、制备方法中采用的有机溶剂选择时，发明人比较了多种有机溶剂，但乙酸乙酯在收率和纯度方面都是最有优势。如与现有文献报道利用不同浓度乙醇提取物相比较，本发明提取物的收率约高出现有文献报道最好收率约1.5个百分点，为13％，测定了提取物中黄芩素的最高含量为65％、总黄酮苷元的含量约为70％，高于目前我们认为可信文献报道的最好纯度。 

3、实验还发现模型组大鼠肾组织SOD活性及GSH含量显著性下降，进一步证实了肾间质纤维化的氧化损伤特点，而黄芩提取物干预后肾组织SOD活性 及GSH含量显著上升，提示黄芩提取物具有提高损伤肾组织的氧化能力，且呈一定的量效关系；由结果推测该抗过氧化损伤，可能是黄芩总黄酮苷元提取物的抗肾纤维化的作用机制之一。