[发明专利]优化的脱氮假单胞菌发酵生产维生素B12方法与合成培养基

权利要求书

1.一种生产维生素B12的发酵方法，其特征在于，它包括步骤：

(a)在适合发酵且钾离子浓度按氯化钾计为0.9-1.05g/L、葡萄糖浓度为70- 75g/L且磷酸氢二铵浓度为5.5-6.0g/L的发酵液的条件下，培养生产维生素B12的 脱氮假单胞杆菌(Pseudomonas denitrificans)，从而产生维生素B12，其中所述的 钾离子浓度以氯化钾计；和

(b)从发酵液中分离纯化出维生素B12。

2.如权利要求1所述的方法，所述步骤(a)采用的发酵液中葡萄糖浓度为 72.2g/L，氯化钾浓度为0.98g/L，磷酸氢二铵浓度为5.7g/L。

3.如权利要求1所述的方法，所述步骤(a)采用的发酵液中葡萄糖浓度为 72.2g/L，氯化钾浓度为0.98g/L，磷酸氢二铵浓度为5.7g/L，磷酸氢二钠浓度为 3g/L，硫酸镁浓度为1.4g/L，尿素浓度为2g/L，硫酸铵浓度为6g/L，微量元素混 合溶液浓度为8ml/100ml发酵液，甜菜碱浓度为10g/L，DMBI浓度为0.08g/L，消 毒前pH值为7.2-7.4，所述微量元素混合液的微量元素组成按g/L计为:FeSO₄·7 H₂O 0.03，CoCl₂·6H₂O 0.016，Na₂MoO₄·2H₂O 0.02和ZnSO₄·6H₂O 0.02。

4.一种用于权利要求1所述方法的培养基，其特征在于，所述的培养基中 钾离子浓度按氯化钾计为0.9-1.05g/L、葡萄糖浓度为70-75g/L且磷酸氢二铵浓度 为5.5-6.0g/L。

5.如权利要求4所述的培养基，所述培养基中葡萄糖浓度为72.2g/L，氯化 钾浓度为0.98g/L，磷酸氢二铵浓度为5.7g/L。

6.如权利要求4所述的培养基，所述培养基中葡萄糖浓度为72.2g/L，氯化 钾浓度为0.98g/L，磷酸氢二铵浓度为5.7g/L，磷酸氢二钠浓度为3g/L，硫酸镁浓 度为1.4g/L，尿素浓度为2g/L，硫酸铵浓度为6g/L，微量元素混合溶液浓度为 8ml/100ml发酵液，甜菜碱浓度为10g/L，DMBI浓度为0.08g/L，消毒前pH值为 7.2-7.4，所述微量元素混合液的微量元素组成按g/L计为:FeSO₄·7H₂O 0.03， CoCl₂·6H₂O 0.016，Na₂MoO₄·2H₂O 0.02和ZnSO₄·6H₂O 0.02。