[发明专利]唾液中亚硝酸根含量的简易测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及人体唾液中物质及含量的测定方法，尤其涉及人体唾液中亚硝酸根含量的简易测定方法。

背景技术

亚硝酸根对人体危害极大。有研究表明，胃癌高发区居民胃液中亚硝酸盐含量较高，而胃内的亚硝酸盐主要来自吞下的唾液，占人体摄入总量75％以上。由于测定胃液中的亚硝酸根含量较难取样，通常实验人员直接以唾液为测定对象，测定唾液中亚硝酸根含量，来分析胃液中的亚硝酸根的含量。

测定唾液中亚硝酸根含量的方法有多种，近年来国内外的报道的检测方法主要有极谱法、色谱法、荧光法和催化光度法等，但这些方法大都较为繁琐，对实验仪器、实验试剂的要求也较高。

发明内容

本发明的目的为提供一种唾液中亚硝酸根含量的简易测定方法，以克服现有唾液中亚硝酸根含量的测定方法存在的繁琐、对实验仪器、实验实际要求高的缺点。

为了实现上述发明目的，本发明采用如下的技术方案：

一种唾液中亚硝酸根含量的简易测定方法，其步骤为：

a、称取对氨基苯磺酸，加入盐酸，搅拌溶解，并加入甲苯胺，搅拌至溶解，使其与对氨基苯磺酸溶液发生重氮化反应，并用水稀释配制成显色液；

b、用a步骤所得显色液滴加到相同体积的不同含量的标准硝酸钠溶液中，然后用分光光度计测量出不同含量标准硝酸钠溶液所对应的吸光度，制作表格，并绘制出吸光度-硝酸根含量标准曲线；

c、量取唾液，加水稀释到与b步骤所述标准硝酸钠溶液相同体积，再滴加a步骤所得显色液，再用分光光度计测量该唾液的吸光度，并根据b步骤所得吸光度-硝酸根含量标准曲线，计算出唾液中硝酸根的含量。

通过上述步骤可以发现，本发明的唾液中亚硝酸根含量的简易测定方法，步骤简单，所采用实验试剂均为普通物质，并且检测仪器也比较简单，最复杂的仪器也仅是分光光度计。因此，本发明的唾液中亚硝酸根含量的简易测定方法具有简便，对对实验仪器、实验试剂的要求低的优点。

附图说明

下面结合附图和具体实施方式对本发明进行详细说明：

图1为吸光度-亚硝酸根含量标准曲线图。

图2为为非吸烟者与吸烟者唾液中亚硝酸根的含量测定比较图。

具体实施方式

本发明唾液中亚硝酸根含量的简易测定方法基于以下化学反应式形成：

最终生成的偶氮化合物显紫红色，而且其颜色的深度与NO2-离子的浓度是正相关(即NO2-离子浓度越大，则颜色越深)。

该唾液中亚硝酸根含量的简易测定方法，具体步骤为：

a、称取对氨基苯磺酸，加入盐酸，搅拌溶解，并加入甲苯胺，搅拌至溶解，使其与对氨基苯磺酸溶液发生重氮化反应，并用水稀释配制成显色液；

b、用a步骤所得显色液滴加到相同体积的不同含量的标准硝酸钠溶液中，然后用分光光度计测量出不同含量标准硝酸钠溶液所对应的吸光度，制作表格，并绘制出吸光度-硝酸根含量标准曲线；

c、量取唾液，加水稀释到与b步骤所述标准硝酸钠溶液相同体积，再滴加a步骤所得显色液，再用分光光度计测量该唾液的吸光度，并根据b步骤所得吸光度-硝酸根含量标准曲线，计算出唾液中硝酸根的含量。

实施例1

用本发明的唾液中亚硝酸根含量的简易测定方法测定非吸烟者与吸烟者唾液中亚硝酸根的含量并比较得出吸烟与唾液中亚硝酸含量的关系。

1.1主要仪器与试剂

721-A数显分光光度计、电子天平；

对氨基苯磺酸、盐酸、甲苯胺、亚硝酸钠。

1.2显色剂与亚硝酸钠标准液的配制

称取对氨基苯磺酸2.003克，加入50mL1∶1盐酸，搅拌溶解，再加入1g甲苯胺，搅拌至溶解，使其与对氨基苯磺酸溶液发生重氮化反应，再转移至500mL棕色容量瓶中，用水稀释至标线。

称取2.5g亚硝酸钠(NaNO2)溶于150mL水中，转移至500mL棕色容量瓶，加入1mL三氯甲烷，用水稀释至标线，再移取5mL溶液，稀释至500mL使每毫升标准液含NaNO2约0.05mg

1.3标准曲线的绘制

分别取0.2mL，0.3mL，0.4mL，0.5mLl，0.6mL，0.7mL，0.8mL，0.9mL，1.0mL，1.2mL，1.4mL，1.6mL亚硝酸钠标准液(25mg/500mLNaNO2)，先分别稀释至100mL再与显色剂反应，静置20分钟后，用分光光度计读出数据(以水为参照液)，见表1；依据表1数据绘制了吸光度-亚硝酸根含量标准曲线，见图1。

表1