[发明专利]一种透明质酸修饰聚氰基丙烯酸烷基酯纳米粒及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明属纳米材料技术领域，具体涉及一种透明质酸修饰聚氰基丙烯酸烷基酯纳米粒及其制备方法和应用。 

背景技术

氰基丙烯酸烷基酯(alkylcyanoacrylate，ACA)是1955年美国Eastman公司合成的一类黏合剂，1959年经FDA批准作为医用胶，1979年Couvreur等首次用于制备载药毫微粒(Couvreur P，et al.，J.Pharm.Sci.1979，68，1521～1524)。已有大量的研究报道利用生物降解性材料聚氰基丙烯酸烷基酯制备纳米粒作为小分子药物、蛋白质多肽和核酸类药物的载体。这些载体在药物保护、转运方面具有许多优势。但静脉注射后这类纳米粒易于被当作异物而迅速从血液中清除，因而需对其表面进行修饰。 

近年来，亲水性多糖修饰纳米粒成为一大研究热点。多糖多为生物内源性物质，一般无毒性，可生物降解，生物相容性好。细胞或组织中具有特定多糖受体，使多糖修饰纳米粒可能具有主动靶向作用。透明质酸是由β-D-N-乙酰氨基葡萄糖和β-D-葡萄糖醛酸为结构单元的以β-1，3和β-1，4糖苷键交替连接而成的一种直链线性阴离子黏多糖，广泛存在于生物体软结缔组织细胞外基质(ECM)、生物体滑液和脐带中。透明质酸最早由美国Meyer等从牛眼玻璃体中分离出来，其重复二糖单元在所有物种和组织中都是一致的，具有低免疫原性，不会导致透明质酸分子自身的免疫排斥反应。作为聚阴离子电解质，其带有大量负电荷，可调节周围正负离子浓度，抑制多种酶的活性。有文献报道如上皮癌、卵巢癌、结肠癌、胃癌和急性白血病细胞表面过量表达透明质酸受体CD44和RHAMM(Jaracz S，et al.，Bioorg.&Med.Chem.2005，13，5043～5054)。利用透明质酸修饰纳米粒有望达到主动靶向于肿瘤细胞的目的。 

传统的制备聚氰基丙烯酸烷基酯纳米粒的方法包括乳液聚合法和界面聚合法。前者是将单体分散到含有表面活性剂或稳定剂的酸性水溶液中，持续搅拌3～4h，得到均一骨架结构的纳米粒。后者是将油相、单体、药物溶于有机溶剂中，搅拌下缓慢加至含表面活性剂的水相中，反应结束后蒸除有机溶剂，得到含油核的纳米囊(Wohlgemuth M，et al.，J Microencapsul，2000，17(4)，437～448)。Chauvierre等采用一种新ACA乳液聚合法即在多糖存在下，通过铈离 子和多糖组成的氧化还原体系引发ACA聚合，合成多糖修饰PACA纳米粒(Chauvierre C，et al.，Pharm.Res.2003，20，1786～1793)。所使用的多糖有右旋糖酐、硫酸右旋糖酐、肝素、透明质酸、壳聚糖和果胶。其中右旋糖酐、硫酸右旋糖酐、肝素修饰纳米粒粒径为93～800nm；透明质酸、壳聚糖、果胶修饰微粒粒径较大，为微米级，具体粒径为30～59μm。 

发明内容

本发明的目的是提供一种透明质酸修饰聚氰基丙烯酸烷基酯纳米粒。 

本发明的另一个目的是提供上述透明质酸修饰聚氰基丙烯酸烷基酯纳米粒的制备方法。 

本发明还有一个目的是提供上述透明质酸修饰聚氰基丙烯酸烷基酯纳米粒的应用，以克服现有技术的不足和缺陷。 

本发明的构思如下： 

利用硝酸铈铵的强氧化性使透明质酸糖链断裂，在末端产生自由基引发氰基丙烯酸烷基酯聚合形成透明质酸修饰聚氰基丙烯酸烷基酯纳米粒。通过控制透明质酸分子量、透明质酸与氰基丙烯酸烷基酯投料比、硝酸铈铵浓度可将粒径控制在纳米范围。氰基丙烯酸烷基酯反应活性较高，常温下痕量的亲核物质(如水中OH^-)就可引发其聚合。反应介质需用pH低于1的酸溶液抑制水中OH^-的阴离子引发作用。同时，酸溶液更易使透明质酸糖链断裂产生自由基。 

酸性条件(pH<1)下硝酸铈铵使透明质酸糖链氧化断裂，末端产生自由基；自由基引发ACA聚合；聚合反应延长产生线性嵌段共聚物透明质酸聚氰基丙烯酸烷基酯。聚合反应过程如下：

本发明的技术方案如下： 

本发明的透明质酸修饰聚氰基丙烯酸烷基酯纳米粒，以至少一种聚氰基丙烯酸烷基酯为疏水内核，透明质酸为亲水外壳。 

所述的透明质酸分子量为18,000～500,000Da。 

所述的氰基丙烯酸烷基酯为氰基丙烯酸乙酯、氰基丙烯酸丙酯、氰基丙烯酸正丁酯、氰基丙烯酸异丁酯或氰基丙烯酸己酯中的一种或多种。 

所述的透明质酸修饰聚氰基丙烯酸烷基酯纳米粒，其粒径为250～850nm。