[发明专利]一种检测乳中抗生素和/或抗生素拮抗剂的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种检测乳中抗生素和/或抗生素拮抗剂的方法，特别涉及利 用酶联免疫法检测乳中抗生素和/或抗生素拮抗剂的方法。

背景技术

牛乳及乳制品是老少皆宜的营养品。随着抗生素在乳畜饲养业中的广泛 应用，牛乳及乳制品中抗生素残留问题日益受到重视。长期饮用含有抗生素 的牛乳，对消费者来说无疑是等于长期服用小剂量的抗生素，残留的抗生素 会抑制肠道内的正常菌群，引发菌群失调症。通过细菌之间的质粒传递，敏 感菌可以与耐药菌株接触获得耐药性使人成为耐药菌株的宿主，从而给临床 治疗带来麻烦。对抗生素有过敏体质的人服用含有残留抗生素的乳后会发生 过敏反应。此外，牛乳中的残留抗生素会影响乳制品的品质，比如酸奶、奶 酪等乳品发酵不能正常进行。我国规定，乳及乳制品中不能检出抗生素。所 以国际上和国内乳品行业拒收抗生素阳性的原料乳，乳制品企业均对原料乳 中的抗生素含量均进行严格的检查。

然而，如果向含有抗生素的原料乳中添加抗生素的拮抗剂，降解乳中的 抗生素，会使得抗生素的浓度降低。在乳品企业收购原料乳时，为确保原料 质量，需要检测抗生素，然而如果人为地向原料乳中添加抗生素的拮抗剂， 会导致目前大规模使用的一般初筛试剂盒不能检出实际的抗生素含量，掩饰 了原料乳原有的质量情况，因此需要一种能够检测乳中抗生素拮抗剂的方 法。

发明内容

本发明的目的是提供一种快速、准确的乳中抗生素和/或抗生素拮抗剂的 检测方法，其简便易行并且适用于规模化初筛原料乳。

本发明提供了一种检测乳中抗生素和/或抗生素拮抗剂的方法，包括如下 步骤：

1)取待测乳加入抗生素，制成有抗待测乳；

2)另取待测乳，与上述有抗待测乳同等条件下放置；

3)分别检测上述有抗待测乳以及上述待测乳中的抗生素；

4)按照如下方法判定待测乳检测结果：

4.1)待测乳中检测出抗生素，则判定待测乳中含有抗生素；

4.2)待测乳中未检测出抗生素，并且，上述有抗待测乳中未检 测出抗生素，则待测乳中含有抗生素和抗生素拮抗剂；

4.3)待测乳中未检测出抗生素，并且，所述有抗待测乳中检测 出抗生素，则待测乳中不含抗生素和拮抗剂。

优选的，本发明的方法还进一步包括如下步骤：

取不含抗生素及抗生素拮抗剂的乳(可以是原料乳或复原乳)加入与步骤 1)等量的抗生素，制成阳性对照乳；将阳性对照乳在与步骤2)相同的条件 下放置；用与步骤3)相同的方法检测阳性对照乳中的抗生素；阳性对照乳中 检测出抗生素时，按照如下方法判定检测结果：

a)所述待测乳B中检测出抗生素，则所述待测乳B中含有抗生 素；

b)所述待测乳B中未检测出抗生素，并且，所述有抗待测乳A中 未检测出抗生素或者所述有抗待测乳A中检测出的抗生素含量 相对所述阳性对照乳C中检测出的抗生素含量降低20％以上 的，则所述待测乳B中含有抗生素和抗生素拮抗剂；

c)所述待测乳B中未检测出抗生素，并且，所述有抗待测乳A中 检测出的抗生素含量相对所述阳性对照乳C中检测出的抗生素 含量相差在所述阳性对照乳C中检测出的抗生素含量的20％以 内的，则所述待测乳B中不含抗生素和拮抗剂。

优选的，所述有抗待测乳、待测乳和/或阳性对照乳的放置条件为：置于 37℃孵育箱或水浴箱孵育2-2.5小时。如没有37℃孵育设备，也可置于25℃ 以上3小时，使抗生素拮抗剂降解抗生素。

优选的，本发明的方法可以检测beta-内酰胺类抗生素，其相应的抗生素 拮抗剂为beta-内酰胺酶。也可以检测四环素类抗生素，其相应的抗生素拮抗 剂为四环素酶。

本发明的方法步骤3)中，可以采用任何一种现有的检测抗生素的方法， 优选的，采用快速检测抗生素试剂盒，如西班牙的利普斯50(ECLIPSE50)、 比利时的TWIN SENSOR、美国的CHARM和美国的SNAP等。

本发明的方法具有快速、简便、准确的优点，可以在短时间内检测大量 样品，便于企业规模化应用。此外，本发明的方法可以采用一份待测乳样品 同时检测抗生素和抗生素拮抗剂，而不必采用不同的方法分别检测，使用简 单的判别方法即可获得检测结果。

具体实施方式