[发明专利]一种抗肿瘤的单克隆抗体的序列及应用

说明书

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体而言本发明提供一种单克隆抗 体，该抗体能特异识别肝癌；肺癌；结肠癌；胰腺癌；乳腺癌；卵巢癌等 恶性肿瘤等恶性肿瘤组织，并能抑制肝癌；肺癌；结肠癌；胰腺癌；乳腺 癌；卵巢癌等恶性肿瘤细胞和组织的生长；以及所述抗体在制备用于治疗 结肠肿瘤的药物中的应用，本发明还提供药物组合物，其包含所述单克隆 抗体作为活性成分。

背景技术

抗体作为疾病预防、诊断和治疗的制剂已有上百年的发展历史。随着 基因工程抗体技术的发展和完善，抗体药物已从鼠单克隆抗体发展到人鼠 嵌合抗体、人源化抗体及人源抗体。截至2007年美国FDA已批准36个 抗体药物。此外还有超过120种抗体药物处于临床研究，超过500种抗体 药物处于临床前研究。这些抗体主要应用于自身免疫性疾病、感染性疾病 以及肿瘤的治疗。

在肿瘤治疗中，由于抗体的精确靶向性和高效低毒的特点弥补了传统 放化疗途径特异性差、副反应强的缺点，已成为肿瘤生物治疗最重要的应 用领域。1997年Rituximab成为首个经FDA认证的用于肿瘤治疗的抗体 药物，在此之后，肿瘤抗体药物的研究发展迅速，截至2007年，已有9 种肿瘤抗体药物上市。预计2011年，肿瘤抗体药物的销售额将达到140 亿美元，占所有抗体药物销售额的47.1％。

原发性肝癌(HCC)是常见的恶性肿瘤之一，死亡率高，严重危害人类 的健康和生命。目前，就世界范围而言，其发病率呈上升趋势，作为一种 高死亡率的疾病，肝癌的病因、发生、演化、诊断、治疗都越来越引起人 们的关注。其中，肝癌的早期诊断对于患者的转归以及预后都具有十分重 要的意义。目前，肝癌诊断的标志物首推AFP，用于肝癌的血清学诊断已 沿用多年，最近又用于肝癌血液转移的基因诊断。但此方法在特异性和敏 感性上仍存在问题。就特异性而言，对于HCC患者，干扰诊断准确性的 因素主要是因为部分伴有肝硬化或慢性肝炎的患者血中可检出AFP蛋白 以及mRNA。由于目前尚缺特异性强的检测和/或治疗肝癌的有效方法， 因此，本领域迫切需要开发特异性抗人肝癌单克隆抗体，以及检测和治疗 肝癌的有效方法。

结直肠癌指大肠内膜上皮细胞的恶性改变，包括异常分化，异常增殖 以及细胞代谢和分泌异常等。其发生原因、诊断治疗和预防一直是基础医 学和临床医学的研究重点。结直肠癌的死亡率居肿瘤死亡的第二位。美国 每年诊断为结直肠癌的病例超过13万，死亡大于5万，死亡率约40％。 结直肠癌在我国是第三位常见消化道肿瘤，位于食管癌和胃癌之后，但每 年死于结直肠癌的病例估计超过4万人，约占肿瘤5.8％。我国结直肠癌 发病一个明显特点是平均发病年龄45岁左右，比欧美等国提前12-18年， 其中直肠癌较多，约占60％。近二十年，随着我国经济增长和人们生活水 平的逐步提高，我国结直肠癌的发病人数逐年增加，发病更趋于年轻化。

胰腺癌为恶性程度极高的消化道肿瘤，其死亡率占我国恶性肿瘤的第 六位，在美国位于第四位。近年来，胰腺癌的发病率呈上升趋势，五年生 存率仍很低，在诊断后的中位生存期为4～6个月(Coppola，2000)。胰腺 癌因其独特的解剖位置，症状隐匿，早期诊断非常困难，目前尚无有效的 早期诊断方法。目前，用于临床的肿瘤抗原检测，均为非特异性的肿瘤相 关抗原，只能通过选择适当的肿瘤标志物进行联合检测，来提高检测的灵 敏性和有效性。

本发明的特色之一是运用人结肠癌组织的分离成份直接在非免疫鼠 源ScFv噬菌体表面呈现表达库中筛选。

本发明的另一个特色是，虽然是用的结肠癌组织作为筛选抗原。但所 筛到的抗体能特异结合多种肿瘤组织，包括肝癌肿瘤；肺癌肿瘤；结肠癌 肿瘤；胰腺癌肿瘤；乳腺癌肿瘤；卵巢癌等。动物实验证明，该抗体能有 效抑制肿瘤的生长。

本发明提供的单克隆抗体命名为CR1G，经过检测单克隆抗体对结肠 癌细胞的选择性结合，而与正常结肠细胞不结合特性，显示出CR1G单克 隆抗体在肿瘤的治疗和诊断方面的高效广谱应用价值。

发明内容

本发明的目的是提供一种单克隆抗体，所述单克隆抗体可与癌症抗原 特异性结合，从而可以用于制备治疗癌症的药物或试剂盒。

具体地，本发明提供以下：

1.一种单克隆抗体，其特征在于，它的重链可变区由124个氨基酸残基组 成，序列如下：