[发明专利]Mac-2BP肿瘤抗原基因、蛋白、抗体及其用途

说明书

技术领域

本发明涉及新的肿瘤抗原基因、该基因编码的蛋白、该蛋白的抗体及所述基因、蛋白、抗体在筛选和/或制备用于诊断和/或治疗肿瘤的药物中的用途。本发明还涉及用于上述用途的试剂盒。

背景技术

肿瘤是人体中正在发育的或成熟的正常细胞，在不同因素长期作用下，出现过度增生成异常分化而形成的新生物。近年来，肿瘤的发病率明显增高，由于传染病的减少，心脑血管病和肿瘤上升为第一、二位的疾病。

目前，肿瘤的治疗方法主要有外科手术、化学治疗、放射治疗、生物治疗和热疗、光动力治疗等方法。生物治疗是指通过生物反应调节剂(BRM)调动宿主的天然防卫机制或给予机体某些物质来取得抗肿瘤的效应，达到治疗肿瘤目的。生物反应调节剂主要有细胞因子：如白细胞介素(IL)、干扰素(IFN)、肿瘤坏死因子(TNF)等；抗肿瘤的体细胞和辅助性的造血干细胞：如LAK细胞、TIL细胞、TAK细胞等；抗体：包括各类抗肿瘤单克隆抗体、抗细胞表面标记抗体等；基因治疗；肿瘤疫苗；抗血管生存剂；细胞分化诱导剂等等。

基因治疗就是一种以预防和治疗疾病为目的的人类基因转移技术，是以改变人的遗传物质为基础的生物医学治疗。随着对肿瘤发生发展分子机制研究的不断深入，肿瘤的基因治疗已成为当前临床肿瘤研究的新热点。

发明内容

本发明的发明人对肿瘤抗原基因进行了研究，发现了在肿瘤发生、发展过程中起作用的基因。发明人通过设计序列进行RNAi干扰证明降低该基因的表达可抑制肿瘤生长及体外侵袭行为。发明人进一步证明该基因编码的多肽在肿瘤细胞中表达，应用该多肽的抗体可治疗肿瘤。

因此本发明一方面提供一种分离的多核苷酸，其具有SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2的多核苷酸片段或可与SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2的多核苷酸片段在严谨条件下杂交的片段或与上述片段互补的片段。所述的多核苷酸可为DNA或RNA。

本发明另一方面涉及编码人肿瘤抗原基因Mac-2BP，该基因含有SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2的多核苷酸片段或可与SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2的多核苷酸片段在严谨条件下杂交的片段或与上述片段互补的片段。所述的多核苷酸可为DNA或RNA。

本发明又一方面涉及一种多肽，其包括与人肿瘤抗原基因Mac-2BP编码的氨基酸序列具有至少50％同一性并且与具有该氨基酸序列的多肽有相同或更高生物活性的氨基酸序列。优选地，该多肽具有如SEQ IDNO：8所示的氨基酸序列。

本发明又一方面涉及一种肿瘤标记物，所述的肿瘤标记物为上述的多肽。

本发明又一方面涉及以上述多肽作为抗原而获得的抗体。该抗体可为单克隆抗体。优选地，所述的抗体为Mac-2BP单克隆抗体13H3。

本发明又一方面涉及上述的多核苷酸和/或上述的多肽和/或上述的抗体在制备抗肿瘤的药物中的用途。

本发明又一方面涉及上述的多核苷酸和/或上述的多肽和/或上述的抗体在制备肿瘤标记制剂中的用途。

本发明所述的肿瘤可以为肺癌。

本发明还涉及一种试剂盒，其包括上述的多核苷酸和/或上述的多肽和/或上述的抗体，和说明书。

附图说明

图1A：单抗13H3抗原蛋白的MALDI-TOF-PMF图。

图1B：质谱鉴定13H3抗原蛋白Mac-2BP氨基酸序列，中括号内的序列为质谱测定的氨基酸序列。

图2A：siRNA瞬时敲降对肿瘤细胞增殖的影响。

图2B：Mac-2BP稳定敲降对肿瘤细胞增殖的影响。

图3A：siRNA瞬时敲降对肿瘤细胞与基质粘附的影响。

图3B：Mac-2BP稳定敲降对肿瘤细胞与基质粘附的影响。

图4A：Mac-2BP瞬时敲降对肿瘤细胞侵袭的影响。

图4B：Mac-2BP稳定敲降对肿瘤细胞侵袭的影响。

图5：固定细胞免疫荧光检测Mac2-BP在肺癌细胞的表达。

图6：肺癌组织与配对癌旁组织免疫组化图(×100倍)，其中30#，高分化腺癌；39#，中分化磷癌；92#，低分化腺癌；T：癌组织；N：正常组织。

图7：Mac-2BP稳转敲降细胞动物实验，其中图7A，移植瘤生长曲线；图7B，移植瘤重量；图7C，裸鼠移植瘤图；图7D，抑制率：p＜0.05。

图8：Mac-2BP抗体体内治疗肿瘤动物实验，其中图8A，移植瘤生长曲线；图8B，肺癌移植瘤；图8C，移植瘤瘤重；图8D，13H3抗体治疗抑制率：P＜0.05。