[发明专利]白蛋白基聚丙烯酸纳米载体及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种药物载体的制备，尤其涉及一种牛血清白蛋白基聚丙烯酸纳米微球及纳米囊药物载体及其制备方法。主要用于毒副作用大、稳定性差的药物载体，实现这类药物的控制释放，使药物具有靶向性，提高药物疗效，降低毒副作用。

背景技术

白蛋白是由近600个氨基酸单元组成的生物高分子，氨基酸之间都以肽链相连，并且扭曲成蚯蚓状或蜂窝状，具有无数的网状空隙，为镶嵌携带药物创造了有利空间条件。白蛋白具有安全无毒、无免疫原性、可生物降解、生物相容性好等优点，因此白蛋白是一种多功能蛋白质，它有许多重要的生理学和药理学功能，能与许多内源和外源性物质如脂肪酸、氨基酸、荷尔蒙、阴阳离子和药物等结合，也能与一些功能性化合物结合。因此，白蛋白被广泛用于制备载药微球，而白蛋白纳米微球及纳米囊载体系统以其独特的靶向性、缓控释特性和保护药物作用，再加上白蛋白本身的良好生物学特性，应用前景非常广阔。

中国专利CN 1144714A公开了一种可生物降解的核壳结构的生物高分子微球的方法，其首先在水/油体系中制备白蛋白微球，粒径＜3μm，然后在油/水体系中制备以白蛋白微球为核，合成高分子为壳的生物高分子微球，粒径＜5μm。该法制备过程较为繁琐，且在制备过程中用到甲苯/氯仿等有毒有机溶剂，明显存在溶剂残留等诸多问题。2004年王恺利用超声乳化-化学交联方法制备了白蛋白纳米球，在制备过程中利用戊二醛甲苯溶液对白蛋白微球进行固化，也存在溶剂残留问题，且用超声乳化法虽可得到尺寸较为均一的纳米乳滴，但由于纳米乳滴的比表面积大，乳滴之间容易合并，所以交联过程中容易发生乳滴之间的交联，形成大微球甚至聚集体，对阿霉素的释放时间也比较短。2005年林本兰利用乳化高温固化法制备了磁性纳米粒阿霉素白蛋白微球，同样存在相同的问题。用两步法低温喷雾提取法虽然制备工艺简单，但仪器复杂，成本昂贵，不利于推广。2006年孟祥利用喷雾干燥法制备了茶多酚磁性白蛋白微球，不仅微球粒径大(30μm)，制备过程复杂，不易操作；而且喷雾干燥法制备纳米囊普遍存在仪器设备投资大，蛋白质药物在均匀分散到高分子材料有机溶液前需雾化冻干成粉末，以减小蛋白质颗粒的大小；制备过程中有可能造成微球粘连。因此，传统方法制备的纳米微球存在着生物相容性及生物降解性差等问题，而且制备过程繁琐，制备中要加入有机溶剂，还存在溶剂残留等问题。

传统的制备空心微囊和纳米囊结构的方法是通过界面聚合或从聚合物混合溶液中析相来制备，但普遍存在如多分散性、壳表面粗糙、核凝固等许多问题，并且制备条件苛刻，仅在特殊条件下才能制成大小、形态均一的空心微囊和纳米囊结构；此外，微囊和纳米囊壁厚的控制也非常困难，大多数情况下微囊和纳米囊的坚固性差，生物侵蚀会造成壳完整性的损坏，这些都限制了空心聚合物微囊和纳米囊的应用。近年来，国内外研究者进行了大量工作，以获得更好的制备空心聚合物微囊和纳米囊的方法，其中模板法受到了普遍关注。此法是在预先制备好的模板颗粒上形成聚合物壳，然后再将模板去除，留下空心聚合物微囊和纳米囊结构。2007陶彩虹利用两种不同大小的二氧化硅颗粒(微米级和亚微米级)作为模板，使蛋白质在其表面沉积，然后通过交联剂戊二醛交联使蛋白质固定在颗粒表面，最后除去二氧化硅模板得到微米级和亚微米级两种蛋白质中空微胶囊。此种方法虽然存在诸多优点，但制备过程中还要考虑很多因素，如只有采用单分散性好的颗粒作为模板，才能制成大小、形状均一的空心微囊和纳米囊。制备完毕还要将颗粒模板去除才能形成中空微胶囊。而且空心聚合物微囊和纳米囊的主要应用领域是医学和生物学，而迄今所制得的空心聚合物微囊和纳米囊材料的生物相容性和生物降解性都较差。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术制备纳米微球及纳米囊存在的工艺复杂、对设备要求高、使用有机溶剂、生物相容性及生物降解性差等方面的缺点，提供一种简便有效的白蛋白基聚丙烯酸纳米载体的制备方法。

一、白蛋白基聚丙烯酸纳米载体的制备

本发明白蛋白基聚丙烯酸纳米载体的制备方法，由以下工艺步骤完成：

①将牛血清白蛋白固体配成浓度为0.001～0.01mg/mL的白蛋白水溶液；

②将丙烯酸用减压蒸馏方法提纯；

③将提纯的丙烯酸加入到上述配制的白蛋白溶液中机械搅拌5～20min，使丙烯酸充分分散于白蛋白溶液中；丙烯酸与牛血清白蛋白的质量比为4∶1～30∶1；