[发明专利]蛋白质结晶条件的筛选方法无效
| 申请号: | 200810150369.5 | 申请日: | 2008-07-17 |
| 公开(公告)号: | CN101320006A | 公开(公告)日: | 2008-12-10 |
| 发明(设计)人: | 尹大川;张辰艳;鹿芹芹;郭云珠;郭卫红;王玺凯;李海生;卢慧甍;叶雅静 | 申请(专利权)人: | 西北工业大学 |
| 主分类号: | G01N25/14 | 分类号: | G01N25/14 |
| 代理公司: | 西北工业大学专利中心 | 代理人: | 黄毅新 |
| 地址: | 710072陕*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 蛋白质 结晶 条件 筛选 方法 | ||
1.一种蛋白质结晶条件的筛选方法,其特征在于包括下述步骤:
(a)用缓冲液溶解蛋白质,使蛋白质的终浓度达到5~50mg/ml,用0.22μm的滤膜过滤除去杂质;
(b)用不同的结晶缓冲液来筛选蛋白质的结晶条件;
(c)蛋白质晶体的形核和生长,在密闭的可设定变温程序的控温箱中进行,预先设定该密闭环境的温度,控温箱从1~4℃开始线性升温,8~336小时后升温至30~60℃,然后从30~60℃线性降温,8~336小时后降至1~4℃,完成一个循环周期;或者设定控温箱从30~60℃线性降温,8~336小时后降至1~4℃,再从1~4℃开始线性升温,8~336小时后升温至30~60℃,完成一个循环周期;
(d)将整个结晶体系在密闭温控箱中完成一个温度循环周期后取出,在显微镜下统计出蛋白质晶体的条件数目。
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