[发明专利]复合蛋白沉淀剂、其制备方法及应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种蛋白沉淀剂，尤其涉及一种SOD生产专用的蛋白沉淀剂、 本发明还涉及该蛋白沉淀剂的制备方法及应用，属于生物制药领域。

背景技术

超氧物歧化酶(Superoxide dismutaee简称SOD)是一种新型酶制剂，是 生物体内重要的抗氧化酶，广泛分布于各种生物体内，如动物，植物，微生 物等。SOD具有特殊的生理活性，是生物体内清除自由基的首要物质。超氧物 歧化酶原来从牛血中制取，现多从猪血中提取，商品名为Orgotdin。目前，国 内外超氧化物歧化酶(SOD)的生产主要经过采血、取血球、丙酮沉淀、热处 理、透析、上柱、浓缩、冷冻干燥而成。采用上述制备工艺的生产车间要达 到制药业标准，工艺非常复杂，要使用大量的机械设备、容器、和各种仪器 装置，还要使用大量的乙醇，氯仿、丙酮等有害的化学试剂，此外，丙酮和 乙醇还不能使用一个回收装置，所以出品率极低，每公斤血液只能生产出0.0 1-0.03克SOD，甚至更少，而且活力标准大多为3500u/mg左右。

如果将现有的超氧物歧化酶的生产工艺进行简化，需要提供一种能够充 分的将动物血液中蛋白质沉淀下来的蛋白沉淀剂，以便提高超氧物歧化酶的 提取和分离效率。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种蛋白沉淀 剂，该蛋白沉淀剂能够有效将动物血液的蛋白质沉淀下来，解决了从动物血 液中提取SOD时，蛋白质沉淀率低、提取分离效果差等问题。

本发明所要解决的技术问题是通过以下技术方案来实现的：

一种复合蛋白沉淀剂，由以下重量份的各组分组成：

5-磺基水杨酸1～1.5份、硫酸钾75～85份和蒸馏水15～25份。

优选的，各组分的重量份是：5-磺基水杨酸1.2份、硫酸钾80份和蒸馏 水20份。

为了达到更好的效果，所述的5-磺基水杨酸和硫酸钾的规格优选为分析 纯。

本发明所要解决的另一个技术问题是提供一种制备复合蛋白沉淀剂的方 法。

本发明所要解决的另一个技术问题是通过以下技术方案来实现的：

一种制备复合蛋白沉淀剂的方法，包括：

按下述重量份称取各组分：5-磺基水杨酸1～1.5份、硫酸钾75～85份 和蒸馏水15～25份；将上述各组分充分混合均匀，即得。

本发明蛋白沉淀剂可以选择性的将动物血液中的杂蛋白沉淀，对于杂蛋 白的沉淀率高达99％以上，而不将超氧物歧化酶沉淀，提高提取和分离超氧 物歧化酶的效率，可应用于超氧物歧化酶的制备和纯化。

具体实施方式

下面结合具体实施例来进一步描述本发明，本发明的优点和特点将会随 着描述而更为清楚。但这些实施例仅是范例性的，并不对本发明的范围构成 任何限制。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本发明的精神和范围下 可以对本发明技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改和替换均 落入本发明的保护范围内。

实施例1复合蛋白沉淀剂的制备

按下述重量份称取各组分：5-磺基水杨酸(分析纯)0.1kg、硫酸钾 7.5kg(分析纯)和蒸馏水(分析纯)1.5kg；将上述各组分充分混合均匀，即得。

实施例2复合蛋白沉淀剂的制备

按下述重量份称取各组分：5-磺基水杨酸(分析纯)0.15kg、硫酸钾(分析 纯)8.5kg和蒸馏水2.5kg；将上述各组分充分混合均匀，即得。

实施例3复合蛋白沉淀剂的制备

按下述重量份称取各组分：5-磺基水杨酸(分析纯)0.12kg、硫酸钾(分 析纯)8.0kg和蒸馏水2.0kg；将上述各组分充分混合均匀，即得。

试验例1本发明复合蛋白沉淀剂应用效果试验

1.取100kg牛凝血块放入搅拌罐中室温搅拌，搅拌时加入实施例1所制 备的复合蛋白沉淀剂1L，持续搅拌20分钟；先用80目滤网过滤，然后用板 框过滤器过滤，收集滤液；

2.取滤液用高速管式离心机离心(转速16000rpm)，取上清液，备用；

3.将上清液用板式膜超滤器进行第一次超滤，膜孔径为50000D，取滤出 液，备用；

4.将步骤3所得到的滤出液经板式膜超滤器进行第二次超滤，膜孔径为 30000D，取截流液，备用。