[发明专利]蛋白质－聚合物缀合物

说明书

技术领域

本发明涉及蛋白质-聚合物缀合物，更具体而言涉及含有一个或多个聚 合物部分、蛋白质部分以及连接子的缀合物。本发明还涉及用于制备所述 蛋白质-聚合物缀合物的方法以及其在治疗乙型肝炎病毒感染或丙型肝炎 病毒感染中的用途。

背景技术

在细胞生物学和重组蛋白质技术方面的进展导致了蛋白质治疗剂 的开发。

然而，仍存在着较大障碍。大多数蛋白质易受蛋白水解降解的影响 并因此在循环系统中的半衰期短。其它的缺点包括低水溶性和诱发中和 抗体。

聚合物(例如聚乙二醇(PEG))与蛋白质的连接阻碍了蛋白水解 酶与蛋白质骨架的接近，导致蛋白质稳定性的增加。此外，它还可以增 加水溶性并使免疫原性减至最小。需要有将聚合物连接到蛋白质上的有 效方法。

发明内容

本发明的一方面涉及包含一种或多种聚合物部分、蛋白质部分和连 接子的基本上纯的(纯度≥80％)缀合物。在所述缀合物中，所述聚合 物部分与所述连接子相连接，所述蛋白质部分N末端的氮原子与所述连 接子相键合；所述连接子是共价键、C_1-10亚烷基、C_2-10亚烯基或C_2-10亚炔基；所述蛋白质部分是α干扰素部分、人生长激素部分或促红细胞 生成素部分。优选地，所述缀合物纯度为90％或更高。此缀合物具有出 乎意料地长的体内半衰期。

本发明的另一个方面涉及式I的蛋白质-聚合物缀合物：

式I

其中R₁、R₂、R₃、R₄和R₅各自独立地是H、C_1-5烷基、C_2-5烯基、C_2-5炔基、芳基、杂芳基、C_3-8环烷基或C_3-8杂环烷基；A₁和A₂各自独立 地是聚合物部分；G₁、G₂和G₃各自独立地是键或连接性官能团；P是 蛋白质部分；m是0或1-10的整数；n是1-10的整数。

参照上式，所述蛋白质-聚合物缀合物可具有一个或多个以下特征： G₃是键，P是蛋白质部分，其中N末端的氨基与G₃相连；A₁和A₂是 分子量为2-100kD(优选10-30kD)的聚环氧烷部分，G₁和G₂各自是 (其中O与A₁或A₂相连，NH与式I中所示的碳原子相连)， 或者G₁和G₂各自为脲、磺酰胺或酰胺(其中N与式I中所示的碳原子 相连)；m是4，n是2，R₁、R₂、R₃、R₄和R₅各自为H；P是包含1-4 个其它氨基酸残基的干扰素部分或被修饰的干扰素部分。

术语“烷基”指单价的直链或支链烃基。烷基的实例包括甲基、乙基、 正丙基、异丙基、叔丁基和正戊基。相似地，术语“烯基”或“炔基”指 包含一个或多个C＝C双键或一个或多个C≡C叁键的单价的直链或支链烃 基。

术语“亚烷基”指二价的直链或支链烃基。相似地，术语“亚烯基” 或“亚炔基”指包含一个或多个C＝C双键或一个或多个C≡C叁键的二价 的直链或支链烃基。

术语“芳基”指具有至少一个芳环的烃环系(单环或双环)。芳基部分 的实例包括但不限于苯基、萘基和芘基。

术语“杂芳基”指具有至少一个芳环的烃环系(单环或双环)，其中所 述芳环包含至少一个作为环系部分的杂原子如O、N或S，并且其余部分 是碳。杂芳基部分的实例包括但不限于呋喃基、吡咯基、噻吩基、噁唑基、 咪唑基、噻唑基、吡啶基、嘧啶基、喹唑啉基和吲哚基。

术语“环烷基”指仅具有碳环原子的部分饱和或完全饱和的单环或双 环环系。实例包括但不限于环丙基、环戊基和环己基。