[发明专利]检测人乳头瘤病毒mRNA的方法

权利要求书

1.一种检查人类个体以评估她们发生宫颈癌的风险的体外方法， 所述方法包括检查所述个体HPV类型16、18、31、33和45中每种 的E6基因的mRNA转录物的表达，然后根据E6 mRNA的表达将个 体归类于两种宫颈癌发生风险类型之一，其中来自至少一种所述HPV 类型的E6 mRNA表达阳性的个体评定为携带整合型HPV，因此将其 归类为发生宫颈癌的高风险个体，而E6 mRNA表达阴性的个体评定 为不携带整合型HPV，因此将其归类为无可检测的宫颈癌风险的个 体，但是所述方法的直接目的不是获得疾病的诊断结果。

2.一种鉴定宫颈细胞异常改变的人类个体的体外方法，所述方 法包括检查所述个体HPV类型16、18、31、33和45中每种的E6基 因的mRNA转录物的表达，其中来自至少一种所述HPV类型的E6 mRNA表达阳性的个体鉴定为宫颈细胞异常改变的个体，但是所述方 法的直接目的不是获得疾病的诊断结果。

3.一种检查人类个体以评估她们发生宫颈癌的风险的体外方法， 所述方法包括检查所述个体HPV类型16、18、31、33和45中一种 或多种的E6基因的mRNA转录物的表达，然后根据E6 mRNA的表 达将个体归类于两种宫颈癌发生风险类型之一，其中来自HPV类型 16、18、31、33或45中至少一种的E6mRNA表达阳性的个体评定 为携带整合型HPV，因此将其归类为发生宫颈癌的高风险个体，而 E6 mRNA表达阴性的个体评定为不携带整合型HPV，因此将其归类 为无可检测的宫颈癌风险的个体，其中所述阳性表达为所测试的每 ml样品或按照所测试的样品总体积计存在超过50个拷贝的所述E6 mRNA，但是所述方法的直接目的不是获得疾病的诊断结果。

4.权利要求1-3中任一项的方法，其中人类个体为以前曾被鉴定 为子宫颈细胞感染人乳突淋瘤病毒DNA的个体。

5.权利要求1-4中任一项的方法，其中人类个体为以前曾被诊断 为ASCUS、CIN1病变或湿疣的个体。

6.权利要求1-5中任一项的方法，所述方法还包括检查所述个体 HPV类型52和/或HPV类型58的E6基因的mRNA转录物的表达， 其中来自至少一种所述HPV类型的E6mRNA表达阳性的个体评定为 携带整合型HPV，因此将其归类为发生宫颈癌的高风险个体，而E6 mRNA表达阴性的个体评定为不携带整合型HPV，因此将其归类为无 可检测的宫颈癌风险的个体。

7.一种用于检测HPV E6基因的mRNA转录物的试剂盒，所述 试剂盒包括一种或多种能扩增HPV类型16、18、31、33和45的E6 转录物某区域的引物对以及一种或多种分子信标探针。

8.权利要求7的试剂盒，所述试剂盒包含分别对HPV类型16、 18、31、33和45具有特异性的引物对。

9.一种用于检测HPV E6基因的mRNA转录物的试剂盒，所述 试剂盒包含一种或更多种、两种或更多种、优选所有种类的以下引物 对及相应的鉴定探针：

5′gatgcaaggtcgcatatgagCCACAGGAGCGACCCAGAAA和5′

AATTCTAATACGACTCACTATAGGGAGAAGGATTCCCATCTCTATATACTA

以及探针    TATGACTTTGCTTTTCGGGA

5′gatgcaaggtcgcatatgagGAAAACGATGAAATAGATGGAG和5′

AATTCTAATACGACTCACTATAGGGAGAAGGGGTCGTCTGCTGAGCTTTCT

以及探针   GAACCACAACGTCACACAATG

5′gatgcaaggtcgcatatgagACTGACCTCCACTGTTATGA和5′

AATTCTAATACGACTCACTATAGGGAGAAGGTATCTACTTGTGTGCTCTGT

以及探针   GGACAAGCAGAACCGGACACATCCAA

5′GATGCAAGGTCGCATATGAGTATCCTGAACCAACTGACCTAT和5′

AATTCTAATACGACTCACTATAGGGAGAAGGTTGACACATAAACGAACTG

′以及探针   GGACAAGCACAACCAGCCACAGC′

5′gatgcaaggtcgcatatgagAACCATTGAACCCAGCAGAAA和5′

AATTCTAATACGACTCACTATAGGGAGAAGGTCTTTCTTGCCGTGCCTGGTCA

′以及探针   GTACCGAGGGCAGTGTAATA′