[发明专利]以乳清为原料发酵生产L-乳酸的方法无效
| 申请号: | 200810137179.X | 申请日: | 2008-09-24 |
| 公开(公告)号: | CN101358215A | 公开(公告)日: | 2009-02-04 |
| 发明(设计)人: | 孙波;郭明若;迟玉杰;徐宁 | 申请(专利权)人: | 东北农业大学 |
| 主分类号: | C12P7/56 | 分类号: | C12P7/56;C12R1/845 |
| 代理公司: | 哈尔滨市松花江专利商标事务所 | 代理人: | 金永焕 |
| 地址: | 150030黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 原料 发酵 生产 乳酸 方法 | ||
1、以乳清为原料发酵生产L-乳酸的方法,其特征在于以乳清为原料发酵生产L-乳酸的方法按以下步骤实现:a、按0.3~0.6g中性乳糖酶与100mL乳清的比例将中性乳糖酶溶于乳清中,在35~45℃的条件下水解2~3h,然后在95~105℃的条件下处理5~10min,得水解糖溶液;b、按体积比1∶20~50将人工诱变米根霉孢子悬液接种于种子培养基,在转速为180~220r/min、温度为30℃的条件下振荡培养12~16h,得种子液;c、将0.2~0.4g硫酸铵、0.05~0.06g磷酸二氢钾、0.02~0.08g硫酸镁和0.01~0.02g硫酸锌加入100mL水解糖溶液中配制成发酵培养基,然后在110~121℃的条件下灭菌10~20min;d、按体积比1∶20~50将种子液接种于发酵培养基中,在转速为180~220r/min、温度为30℃的条件下发酵55h后加入6.5~7.0g无菌碳酸钙,继续发酵至72~78h,即得L-乳酸;其中步骤a中乳清为预处理后pH值为6.5~7.0、乳糖体积浓度为15%~25%的乳清;步骤a中乳清为甜乳清、乳清粉或乳清渗透液;步骤b中种子培养基按6g葡萄糖、0.2g硫酸铵、0.06g磷酸二氢钾、0.025g硫酸镁、0.01g硫酸锌和100mL水的比例配制,自然pH。
2、根据权利要求1所述的以乳清为原料发酵生产L-乳酸的方法,其特征在于步骤a中按0.5g中性乳糖酶与100mL乳清的比例将中性乳糖酶溶于乳清中,在40℃的条件下水解2.5h,然后在100℃的条件下处理8min。
3、根据权利要求1所述的以乳清为原料发酵生产L-乳酸的方法,其特征在于步骤a中乳清为预处理后pH值为6.5、乳糖体积浓度为20%的乳清。
4、根据权利要求1所述的以乳清为原料发酵生产L-乳酸的方法,其特征在于步骤b中按体积比1∶40将人工诱变米根霉孢子悬液接种于种子培养基,在转速为200r/min、温度为30℃的条件下振荡培养14h。
5、根据权利要求1所述的以乳清为原料发酵生产L-乳酸的方法,其特征在于步骤c中将0.3g硫酸铵、0.055g磷酸二氢钾、0.05g硫酸镁和0.015g硫酸锌加入100mL水解糖溶液中配制成发酵培养基,然后在115℃的条件下灭菌15min。
6、根据权利要求1所述的以乳清为原料发酵生产L-乳酸的方法,其特征在于步骤d中按体积比1∶40将种子液接种于发酵培养基中,在转速为200r/min、温度为30℃的条件下发酵55h后加入6.6g无菌碳酸钙,继续发酵至75h。
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