[发明专利]一种组织冻存液

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及活体组织细胞培养技术，尤其涉及一种能够保持深低温冻存生物组织细胞活性的组合物。

背景技术

细胞冻存液(或称为细胞冷冻保护剂)是指可以保护细胞免受冷冻损伤的物质，其将拟冻存的活性组织细胞悬浮于冻存液，供给细胞生命代谢所必须的营养物质，同时具有防止或减少冷冻冰晶对细胞的损伤作用。常规冻存液配方均为：细胞培养液70～80％、牛血清10～20％、二甲亚矾10％。普遍使用的细胞培养液有四种：RPMI-1640、MEM、Eagfe和TC-199细胞培养液均己市场商品化。冻存液的作用在长期的细胞生物学实验中，广泛地使用的是此常规配方的细胞冻存液，经过大量实际生物细胞学操作实验、相关学术刊物报道认为：在排除其它影响因素的情况下，复苏率为40～70％。

在生物学技术飞速发展的当今，人们在细胞生物学及其相关学科的研究中，越来越多的运用组织细胞培养增殖技术，将有研究意义或有应用前景的活体组织细胞采用低温度进行长期保存数年、数十年甚至数百年，一旦需要，可随时对所保存的组织细胞进行复苏，恢复其完整的形态结构与生物学特性，供生命科学研究实验。复苏率的高或低，是直接影响人工培养组织细胞增殖是否成功和顺利进行的一个关键技术。而细胞冻存液则是在细胞冻存过程中起到保护和营养细胞的关键溶液，所以，细胞冻存液的配方与含量，对细胞复苏率有重要和直接的影响作用。

发明内容

本发明的目的就在于克服现有技术存在的上述不足，而提供一种复苏率高的细胞冻存液。

为了实现上述目的，本发明是采用如下技术方案，本发明细胞冻存液的各成分的体积百分比为：18～25的二甲基亚矾，12～18的乙酞胺，3～6的丙二醇，3～8的2，3一丁二醇，5～7的聚乙二醇。

本发明的有益效果

本发明的细胞冻存液能有效地防止生物组织细胞在极快的降温和复温过程中冰晶形成对生物组织细胞造成冷冻损伤，因而显著提高了生物组织细胞冷冻保存的存活率，细胞复苏率可达80-90％以上，较使用常规细胞冻存液的复苏率有了显著提高，保证了细胞生长质量和生物学特性，缩短了细胞复苏的增殖周期。使复苏后的组织培养细胞能及时、保质保量的提供生物学研究实验。在组织细胞培养增殖技术中，应用本发明的细胞冻存液明显了提高冻存细胞复苏率、提高了工作效率。

具体实施方式

实施例1

本发明细胞冻存液的各成分的体积百分比为：二甲基亚矾～19.5，乙酞胺～14.5，丙二醇～3.5，2，3一丁二醇～4.5，聚乙二醇～5。

实施例2

本发明细胞冻存液的各成分的体积百分比为：二甲基亚矾～21.5，乙酞胺～16.5，丙二醇～5.5，2，3一丁二醇～6.5，聚乙二醇～7。

实施例3

本发明细胞冻存液的各成分的体积百分比为：二甲基亚矾～20.5，乙酞胺～15.5，丙二醇～4.5，2，3一丁二醇～5.5，聚乙二醇～6。