[发明专利]一种红缨海棠组织培养快速繁殖的方法

说明书

一、技术领域

本发明属林业中通过组织培养的植物再生技术领域，具体涉及一种红缨海棠 组织培养快速繁殖苗木的生产方法。

二、背景技术

红缨海棠(Malus ‘Hongying’)，属蔷薇科苹果属落叶小乔木，是南京林 业大学2007年选育的海棠新品种。海棠是蔷薇科(Rosaceae)苹果属(Malus) 植物，为落叶小乔木或灌木，极少数种生长于亚热带地区，呈半常绿乔木，分布 在横跨欧亚大陆和北美洲、北纬20°～50°之间的区域内。全世界约有50个种， 我国约有23各种，其中16个为特有种，常见的有垂丝海棠(Malus halliana)、 海棠果(Malus prunifolia)、湖北海棠(Malus hupehensis)、西府海棠(Malus micromalus)等。

海棠春可赏妖艳花姿，花色有绯红、粉红、浅红、白色及复色等；秋可观累 累硕果，红黄相映，晶莹剔透，如珠似玉摇曳枝头，又或果实硕大、芳香扑鼻， 极具特色。因而，海棠在我国栽培历史悠久，在历代都作为极具观赏价值的观赏 树种应用于园林中。古典园林中海棠多孤植、对植、丛植，可以充分展现海棠的 花、叶、枝、干及果的单体美，现代园林中海棠的种类选择和配置形式则须视造 景需要和空间大小而定，小型空间宜选择株型较小的海棠品种，如山荆子、日本 海棠，孤植或三五丛植。大型空间选择西府海棠、湖北海棠、垂丝海棠等株型较 大的种类群植或片植，造成远看花开似锦，近看则树影婆娑、枝柔花丰的景观。 据统计，目前全世界观赏海棠品种据统计约有900多种，我国虽是海棠的分布中 心，拥有较多种，但长期以来海棠的繁殖和栽培技术比较落后，其园林绿化上广 泛应用的仍是几个传统品种。

红缨海棠是一集观叶、观花、观果于一体的海棠新品种，其小枝红色，新叶 紫红色，密披白色绒毛，花紫红色，花期3～4月，果期5～10月，果实较大，成 熟后紫红色，在园林上有着广阔的应用前景。目前，红缨海棠培育处于初级阶 段，主要采用嫁接、扦插等传统方法进行苗木繁殖，但繁殖系数很低。

组织培养苗木繁殖技术，是目前林木生物技术的主要内容之一。其主要特点 是繁殖速度快、繁殖系数高、经济高效、管理方便、生长周期较短、且不受地 区、气候的影响，可以及时提供大量优质种苗等优点。

由于不同树种，甚至同一树种、不同品种的林木，其组织培养方法也有很大 差异。目前，国内外虽然已有多个树种的组织培养苗木繁殖技术专利和报导发 表，由于红缨海棠完全是一个林木新品种，因此，目前尚无红缨海棠组织培养的 文献报道。寻找并探索红缨海棠这一林木新品种的组织培养快速繁殖方法，是当 前快速繁殖、推广红缨海棠这一优良林木新品种的迫切任务。

三、发明内容

本发明的目的是根据当前红缨海棠培育处于初级阶段，主要采用嫁接、扦插 等传统方法进行苗木繁殖，但繁殖系数很低的状况，寻找并探索红缨海棠这一林 木新品种的组织培养快速繁殖方法。

本发明的技术解决方案为：一种红缨海棠组织培养快速繁殖的方法，其特征 在于以当年生枝条为外植体，经过无菌处理、接种启动培养、分化培养、增殖培 养、生根培养和炼苗移栽后获得幼苗。接种启动培养、分化培养、增殖培养使用 的均为N6基本培养基，生根培养使用的为大量元素减半的1/2N6基本培养基。

N6基本培养基(中国科学院植物研究所和黑龙江省农业科学院的科研工作 者所设计)和MS基本培养基(Murashing and Skoog medium)、WPM(Woody Plant Medium)木本植物组织培养基和GD(Gupta and Durzan medium)基本培养 基等常用生物组织培养基一样，也是林木组织培养快速繁殖中常用的培养基配 方，其特点是低N、Mg²⁺、Ca²⁺、NH₄⁺，高K⁺，并具有较高的NO₃^-/NH₄⁺，因为 铵这一营养成分可能对有些培养物有抑制生长的作用。

本发明中使用的N6基本培养基和1/2N6基本培养基的具体配方如下：

N6基本培养基

大量元素

KNO₃              2830mg·L^-1