[发明专利]同型半胱氨酸诊断试剂盒及同型半胱氨酸浓度测定方法

权利要求书

1.一种间接酶循环扩增法、酶比色法及酶联法技术的同型半胱氨酸浓度测定方法，其方法原理如下：

同型半胱氨酸+水  同型半胱氨酸-α，γ-裂解酶 硫化氢+氨+

                                                  α-氧代丁酸

氨+丙酮酸+还原型辅酶  丙氨酸脱氢酶  丙氨酸+水+辅酶

丙氨酸+水+氧  甘氨酸氧化酶  氨+丙酮酸+过氧化氢

过氧化氢+还原型色原体组合  过氧化物酶  吲嗒胺色原或

                                             醌亚胺色原+水

将最终反应物置于可见光分析仪下，检测400-700nm处直接反映吲嗒胺色原或醌亚胺色原含量高低的光吸收速度，得出同型半胱氨酸浓度大小测定结果。

2.一种同型半胱氨酸诊断试剂盒，主要成分包括：

缓冲液                        20——500mmol/L

稳定剂                        1——4000mmol/L

过氧化物酶                    500——80000U/L

同型半胱氨酸-α，γ-裂解酶    1000——80000U/L

丙氨酸脱氢酶                  1000——80000U/L

甘氨酸氧化酶                  1000——80000U/L

过氧化物酶                    1000——80000U/L

丙酮酸                        1——50mmol/L

还原型辅酶                    1——50mmol/L

还原型色原体组合              0.1——20mmol/L

试剂成分的浓度不一定只限于上述范围；在此范围内效果较好，在此范围外，试剂仍会反应作用。

其特征在于：试剂盒可以是干粉状态，在使用前加水溶解后使用；也可以配制成液体试剂，直接使用。

3.根据权利要求2所述同型半胱氨酸诊断试剂盒，其特征在于：由缓冲液、稳定剂、同型半胱氨酸-α，γ-裂解酶、丙氨酸脱氢酶、甘氨酸氧化酶、过氧化物酶、丙酮酸、还原型辅酶、过氧化物酶、还原型色原体组合组成单剂试剂。

4.根据权利要求2所述同型半胱氨酸诊断试剂盒，其特征在于：由缓冲液、稳定剂、同型半胱氨酸-α，γ-裂解酶、丙氨酸脱氢酶、甘氨酸氧化酶、过氧化物酶、丙酮酸、还原型辅酶、过氧化物酶、还原型色原体组合组成双剂试剂；试剂1，由缓冲液、稳定剂、丙酮酸、还原型辅酶、还原型色原体组合组成；试剂2，由缓冲液、稳定剂、同型半胱氨酸-α，γ-裂解酶、丙氨酸脱氢酶、甘氨酸氧化酶、过氧化物酶、过氧化物酶、还原型色原体组合组成。过氧化物酶、还原型色原体组合、同型半胱氨酸-α，γ-裂解酶、丙氨酸脱氢酶、甘氨酸氧化酶、过氧化物酶、丙酮酸、还原型辅酶在试剂1或试剂2中的位置可以不限。

5.根据权利要求2所述同型半胱氨酸诊断试剂盒，其特征在于：由缓冲液、稳定剂、同型半胱氨酸-α，γ-裂解酶、丙氨酸脱氢酶、甘氨酸氧化酶、过氧化物酶、丙酮酸、还原型辅酶、过氧化物酶、还原型色原体组合组成多剂试剂；试剂1，由缓冲液、稳定剂、丙酮酸、还原型辅酶、还原型色原体组合组成；试剂2，由缓冲液、稳定剂、丙氨酸脱氢酶、甘氨酸氧化酶、过氧化物酶、过氧化物酶、还原型色原体组合组成；试剂3，由缓冲液、稳定剂、同型半胱氨酸-α，γ-裂解酶组成。过氧化物酶、还原型色原体组合同型半胱氨酸-α，γ-裂解酶、丙氨酸脱氢酶、甘氨酸氧化酶、过氧化物酶、丙酮酸、还原型辅酶在试剂1、试剂2或试剂3中的位置可以不限。