[发明专利]一种生物材料玻璃化冷冻载体及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于生物医学领域，涉及一种生物材料玻璃化冷冻载体及其制备方法。 

背景技术

目前，低温冷冻技术在辅助生殖领域应用广泛。玻璃化冷冻技术是利用体积微小的冷冻承载工具，在极快速降温(>2 000℃/min)过程中，使高浓度的冷冻保护液由液态转变为黏度很高的类似玻璃样的固态，避免细胞内冰晶的形成，达到冷冻保护的作用，从而显著提高细胞/组织冷冻后的存活力和发育能力。玻璃化冷冻技术具有简单、高效、省时、安全、费用少等优点。近年来，玻璃化冷冻技术在人卵与胚胎的冷冻保存中的应用逐渐增多，利用该技术对人未成熟卵母细胞、成熟卵母细胞、胚胎及囊胚进行冷冻均已有成功报道。 

冷冻载体是冷冻保存时承载细胞/组织的物体，玻璃化冷冻成功的关键因素之一就是选择适当的冷冻载体。目前使用的玻璃化冷冻载体主要包括：开放式拉细麦管、封闭式拉细麦管、电子显微镜铜网、Cryoloop、Cryotop和Cryoleaf等。玻璃化冷冻载体的功能在于：承载标本的同时尽量减少负载的冷冻液，达到以下两个目的：冷冻过程中使标本直接接触液氮，快速降温达到玻璃化状态；解冻过程中使冻存标本充分接触解冻液，及时脱离高浓度冷冻保护剂环境。 

目前已有的玻璃化冷冻载体在制作、使用中存在着各种问题，影响了冻存效率和玻璃化冷冻技术的开展。开放式拉细麦管或封闭式拉细麦管存在如下问题：制作过程中加热装置(酒精灯或热板)的温度不易控制，温度稍低不能将麦管拉长，温度稍高麦管易断；存储过程中易受到外力破坏而断损，致冻存标本丢失。电子显微镜铜网、Cryoloop、Cryotop在冷冻过程及储存过程容易丢失标本。所以上述冷冻载体在临床应用推广中可行性差，不被广泛接受。Cryoleaf是目前临床上应用最广泛的冷冻载体，但费用昂贵(每支约200元人民币)，在科学研究中难以广泛采用。 

发明内容

本发明的目的是提供一种生物材料玻璃化冷冻载体及其制备方法。 

本发明提供的生物材料玻璃化冷冻载体，其特征在于：它包括注射针头1和麦片2；

所述注射针头1由针头1-1和针头座1-2组成； 

所述麦片2为开放型拉细麦管，其一端2-1套设于所述针头1-1的内腔中；另一游离端2-2的麦管壁部分缺失，余留麦管壁的横截面为圆周的1/5-1/3。 

所述针头1-1的内腔与所述开放型拉细麦管的口径最好匹配。 

所述冷冻载体还可包括防护套3，所述针头1-1和所述麦片2套设于防护套3内。 

为了组装方便，所述麦片2套设于所述针头中的一端2-1的端缘为尖端；所述针头1-1的端缘为平端。 

所述麦片2游离端2-2余留麦管壁的横截面具体可为圆周的1/3。 

所述麦片2的厚度最好控制在80-100um之间，外径、内径及长度可根据所选用的注射针头而定。 

所述麦片2的外径具体可为0.8-1.2mm，优选1mm；所述麦片2的内径具体可为0.6-1.04mm，优选0.8mm；所述麦片2的长度具体可为2.5-3.5cm，优选3cm。 

所述注射针头可为任何市售注射针头，所述麦片可由任何市售麦管制作而成。 

所述针头1-1的材质具体可为金属，所述针头座1-2的材质具体可为塑料，所述麦片2的材质具体可为聚乙烯，所述防护套3具体可为注射器针头套。 

本发明还提供了制备所述生物材料玻璃化冷冻载体的方法。 

本发明提供的制备方法，包括如下步骤：是将开放型拉细麦管的一端2-1套设入注射针头1的针头1-1的内腔中；另一端2-2沿纵向切去部分麦管壁，余留麦管壁的横截面为圆周的1/5-1/3；得到生物材料玻璃化冷冻载体。 

所述方法中，所述开放型拉细麦管是将麦管在沸水浴中拉长得到的。 

所述方法中还可包括将防护套3套设于所述针头1-1和麦片2外的步骤。 

为了组装方便，所述麦片2套设于所述针头中的一端2-1的端缘为尖端；所述针头1-1的端缘为平端。 

所述麦片2游离端2-2余留麦管壁的横截面具体可为圆周的1/3。 

所述麦片2的厚度最好控制在80-100um之间，外径、内径及长度可根据所选用的注射针头而定。 

所述麦片2的外径具体可为0.8-1.2mm，优选1mm；所述麦片2的内径具体可为0.6-1.04mm，优选0.8mm；所述麦片2的长度具体可为2.5-3.5cm，优选3cm。