[发明专利]一种美洲大蠊药材及其提取物的指纹图谱质量测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种中药材的质量测定方法，特别是涉及美洲大蠊药材及其提取物的指纹图谱质量测定方法。

背景技术

美洲大蠊药材收载于《云南省药品标准》1996年版，主要成分为氨基酸(丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸等)和生物碱(尿嘧啶等)。在该药材质量标准仅进行了总氨基酸的含量测定和氨基酸的鉴别，以上方法均不能较好的控制美洲大蠊药材，特别是主要有效成分生物碱的质量控制。而对美洲大蠊药材及提取物中生物碱的HPLC指纹图谱方法测定至今尚无报道。因此，通过研究，建立重复性高的美洲大蠊药材及提取物中生物碱的HPLC指纹图谱的测定方法，可作为测定美洲大蠊药材及提取物中生物碱的化学组分方法，也可作为鉴定美洲大蠊药材及提取物质量控制方法。

发明内容

本发明的目的在于公开美洲大蠊药材及其提取物的指纹图谱的质量测定方法。

本发明目的是通过如下技术方案实现的。

本发明美洲大蠊药材的指纹图谱质量测定方法，该方法包括如下步骤：

A、供试品溶液的制备：称取美洲大蠊1～10重量份，加50～95％乙醇20～200体积份，回流1～8小时，放冷，滤过，滤液回收乙醇，置25体积份量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，滤过得续滤液；取阳离子交换树脂，研磨，过40～60目筛去粗粒，再过140～160目筛去细粒，用水浸泡18～30小时，倾去水后用2～3倍量的2mol/L盐酸溶液浸泡1～3小时，间隔搅拌3～5次，除去酸液，用水洗至近中性，加3～5倍量的1mol/L氢氧化钠溶液浸泡1～3小时，间隔搅拌3～5次，除去碱液，用水洗至近中性，加2～4倍量的2mol/L盐酸溶液，浸泡1～3小时，间隔搅拌3～5次，除去酸液，用水洗至近中性，水中浸泡放置，备用；取续滤液10体积份，加于已处理好的阳离子交换树脂柱上，收集流出液，用5-10体积份水洗涤阳离子交换树脂柱，收集洗涤液，与流出液合并，转移至25体积份量瓶中，定容，摇匀，备用；

B.对照品溶液的制备：称取尿嘧啶，加水制成每体积份含尿嘧啶0.0000002～0.0001重量份的溶液，作为对照品溶液；

C.测定：色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.01～0.2mol/L的磷酸氢二铵溶液为流动相；检测波长为240～280nm；吸取供试品溶液和对照品溶液各0.005～0.05体积份注入液相色谱仪，照高效液相色谱法测定，得到美洲大蠊药材的指纹图谱；供试品指纹图谱应与标准指纹图谱相似度应大于0.90；美洲大蠊药材共有11个共有指纹峰，参照峰S为尿嘧啶色谱峰，11个共有指纹峰的相对保留时间分别为：1号峰0.480±0.048，2号峰0.508±0.051，3号峰0.556±0.056，4号峰0.629±0.063，5号峰0.780±0.078，S号峰1.000±0.000，6号峰1.295±0.130，7号峰1.901±0.190，8号峰2.108±0.211，9号峰2.655±0.266，10号峰3.515±0.352；11个共有指纹峰中，5个峰面积的比值分别为：2号峰∶3号峰∶4号峰∶S号峰∶8号峰＝(0.223～0.414)∶(0.188～0.349)∶(0.996～1.494)∶1.000∶(0.376～0.626)。

本发明美洲大蠊药材的指纹图谱质量测定方法，优选如下检测方法：

A、供试品溶液的制备：称取美洲大蠊5重量份，加85％乙醇50体积份，回流3小时，放冷，滤过，滤液回收乙醇，置25体积份量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，滤过得续滤液；取阳离子交换树脂，研磨，过50目筛去粗粒，再过150目筛去细粒，用水浸泡24小时，倾去水后用2～3倍量的2mol/L盐酸溶液浸泡2小时，间隔搅拌4次，除去酸液，用水洗至近中性，加4倍量的1mol/L氢氧化钠溶液浸泡2小时，间隔搅拌4次，除去碱液，用水洗至近中性，加3倍量的2mol/L盐酸溶液，浸泡2小时，间隔搅拌4次，除去酸液，用水洗至近中性，水中浸泡放置，备用；取续滤液10体积份，加于已处理好的阳离子交换树脂柱上，收集流出液，用10体积份水洗涤阳离子交换树脂柱，收集洗涤液，与流出液合并，转移至25体积份量瓶中，定容，摇匀，备用；

B、对照品溶液的制备：称取尿嘧啶，加水制成每体积份含尿嘧啶0.00001重量份的溶液，作为对照品溶液；