[发明专利]一种由木质纤维质原料制备微生物油脂的方法

权利要求书

1.一种由木质纤维质原料制备微生物油脂的方法，其特征在于，工艺包括：由木质纤维质原料通过两步水解法制备水解液，以及水解液经两次补料发酵工艺制备微生物油脂；

所述由木质纤维质原料通过两步水解法制备水解液的工艺步骤包括：

(1)水解前用粉碎机对甘蔗渣或玉米芯进行粉碎，然后用质量分数为1-2％的NaOH按液固比15-25∶1在振荡器上将木质纤维质原料处理15-20小时，再用去离子水将原料洗净后烘干，将烘干后的原料用1-2％硫酸110-130℃水解，水解体系中液固质量比：8-10∶1，水解2-4h后得到水解液；

(2)所得水解液减压蒸馏去除糠醛，并将水解液浓缩至总糖浓度在30-50g/L，用KOH调节水解液pH为6-7；

所述木质纤维质原料水解液经两次补料发酵工艺制备微生物油脂的工艺步骤为：

(1)将黏红酵母接入种子培养基培养24-30h，以5％-10％的体积百分数接种量接入发酵培养基；摇瓶培养温度25-35℃，摇床转速150-250r/min；发酵罐培养pH＝6.0-7.0，通气量0.5-1.1vvm，搅拌转速300-600r/min；所述的种子培养基为：葡萄糖：15g/L；(NH₄)₂SO₄：2g/L；酵母粉：1g/L；KH₂PO₄：7g/L；Na₂HPO₄：2g/L；MgSO₄：1.5g/L；pH＝5.5；所述的发酵培养基为木质纤维质原料水解液离心所得上清液中加入KNO₃：3.8g/L；酵母粉：4g/L；KH₂PO₄：6g/L；Na₂HPO₄：2g/L；MgSO₄：2g/L；pH＝6；

(2)发酵培养至菌体对数生长后期24-48h以及发酵后期60-96h进行补料，向培养基中补加10g/L-20g/L葡萄糖和木糖的混合溶液或木质纤维质原料水解液碳源，并以C/N＝40-50质量比同时进行硫酸铵或硝酸钾氮源的补加；

(3)发酵72-144h结束，4℃，4000-5000r/min离心菌体，提取微生物油脂进行测定；

所述的木糖与葡萄糖比为2-2.5∶1。