[发明专利]微杆菌的固定化方法及其用于生产(－)γ－内酰胺的方法

权利要求书

1.一种微杆菌的固定化方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将聚乙烯醇和海藻酸钠混合后加热溶解，冷却至40℃以下后与微杆菌细胞混合均匀得到混合溶液；所述的微杆菌Microbacteriumhydrocarbonoxydans保藏号为CGMCC No.2350；在该混合溶液中海藻酸钠浓度为10～30g/L，聚乙烯醇浓度为30～100g/L，微杆菌细胞浓度为5～20g/L；

(2)将均匀混合有微杆菌细胞的聚乙烯醇-海藻酸钠溶液滴入含有氯化钙的硼酸饱和溶液中，形成珠体，即为固定化细胞；氯化钙在最终溶液中浓度为10～30g/L。

2.应用权利要求1所述固定化方法得到的固定化细胞生产(-)γ-内酰胺的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)制备生物催化剂：将固定化细胞用生理盐水洗涤，得到生物催化剂；

(2)生物转化实验：将步骤(1)中的生物催化剂与2～20g/L(+/-)γ-内酰胺溶液混合，在25～50℃pH6.0～8.0条件下，200～220转/分钟振荡1～12小时；

(3)分离样品：取步骤(2)中的转化液，以10000转/分钟离心5分钟以上，得到上清液即为样品。