[发明专利]伏格列波糖中间体的分析检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及医药技术领域，更具体的说，是涉及伏格列波糖中间 体(1S)-(1(羟基)，2，4/1，3)-2，3，4-三-O-苄基-1-C-[(苄氧基)-甲 基]-6，6-二硫甲基-5-氧-1，2，3，4-环己四醇及其非对映异构体的分 离和分析检测方法。

背景技术

伏格列波糖中间体(1S)-(1(羟基)，2，4/1，3)-2，3，4-三-O-苄基 -1-C-[(苄氧基)-甲基]-6，6-二硫甲基-5-氧-1，2，3，4-环己四醇作为 伏格列波糖的重要中间体，其在构型上存在光学异构体，即 (1R)-(1(羟基)，2，4/1，3)-2，3，4-三-O-苄基-1-C-[(苄氧基)-甲 基]-6，6-二硫甲基-5-氧-1，2，3，4-环己四醇。因此，对(1S)-(1(羟 基)，2，4/1，3)-2，3，4-三-O-苄基-1-C-[(苄氧基)-甲基]-6，6-二硫甲 基-5-氧-1，2，3，4-环己四醇的质量控制效果直接影响到最终成品的 质量。

文献US5004838和Synthesis of a Branched-Chain Inosose Derivative，J.Org.Chem.Vol 57，No.13，1992报道了伏格列波糖中间 体(1S)-(1(羟基)，2，4/1，3)-2，3，4-三-O-苄基-1-C-[(苄氧基)-甲 基]-6，6-二硫甲基-5-氧-1，2，3，4-环己四醇及其异构体的制备方法 以及熔点、旋光度等文献参数。该质量控制存在以下不足：1、旋光 度对手性中间体的质量控制较为粗略，不能准确反映出产品的绝对光 学纯度。2、该方法不能准确控制异构体的限量，对后续合成的产品 质量影响很大。

发明内容

本发明的目的目的在于提供一种伏格列波糖中间体的分析检测 方法，是一种应用反相高效液相色谱法分析(1S)-(1(羟 基)，2，4/1，3)-2，3，4-三-O-苄基-1-C-[(苄氧基)-甲基]-6，6-二硫甲 基-5-氧-1，2，3，4-环己四醇及其非对映异构体的方法。该方法可以准 确分析出(1S)-(1(羟基)，2，4/1，3)-2，3，4-三-O-苄基-1-C-[(苄氧 基)-甲基]-6，6-二硫甲基-5-氧-1，2，3，4-环己四醇的光学纯度，也可 以准确的检测非对映异构体(1R)-(1(羟基)，2，4/1，3)-2，3，4-三-O- 苄基-1-C-[(苄氧基)-甲基]-6，6-二硫甲基-5-氧-1，2，3，4-环己四醇 的限度，并且该方法具有灵敏度高、精密度好、快速、稳定和简便等 优点。

本发明采用如下技术方案：一种伏格列波糖中间体的检测方法， 用于(1S)-(1(羟基)，2，4/1，3)-2，3，4-三-O-苄基-1-C-[(苄氧基)-甲 基]-6，6-二硫甲基-5-氧-1，2，3，4-环己四醇及其非对映异构体的检 测，采用以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以乙腈-醋酸铵 溶液体系或乙腈-磷酸盐溶液体系作为流动相，以检测波长为200nm～ 300nm，进行反相高效液相色谱法检测。

所述的检测波优选为210nm±2nm。

所述的乙腈-醋酸铵溶液体系是由乙腈和0.1mol/l的醋酸铵溶液 按体积比80∶20比例形成的流动相。

本发明的这种分析检测方法，能够用普通的C18柱同步分离 (1S)-(1(羟基)，2，4/1，3)-2，3，4-三-O-苄基-1-C-[(苄氧基)-甲 基]-6，6-二硫甲基-5-氧-1，2，3，4-环己四醇及其非对映异构体，分离 度高达3.7，能完全基线分离。利用反相高效液相色谱法进行检测分 析，灵敏度高，R型异构体检出限为10ng。能准确检、灵敏地测出 (1S)-(1(羟基)，2，4/1，3)-2，3，4-三-O-苄基-1-C-[(苄氧基)-甲 基]-6，6-二硫甲基-5-氧-1，2，3，4-环己四醇及其R型异构体的光学 纯度，有效控制R型异构体的限度，为最终成品质量提供有效保证。 本发明所述反相高效液相色谱法使用的色谱柱可以是不同厂家生产 的、不同型号的十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱。

附图说明

图1  S型异构体高效液相色谱图。

图2  R型异构体高效液相色谱图。

图3  S型+R型异构体高效液相色谱图。

图4  基线噪音高效液相色谱图。

图5  R型异构体检出限高效液相色谱图。