[发明专利]内皮细胞增殖抑制剂及其应用方法

说明书

本申请是申请日为1996年12月13日、申请号为96199011.2、发明创造 名称为“内皮细胞增殖抑制剂及其应用方法”的申请的分案申请。

技术领域

本发明涉及新型内皮细胞增殖抑制剂。该抑制剂能抑制血管生成相 关性疾病和调节血管生成过程。此外，本发明涉及测定生物流体样本中 存在的抑制剂量的诊断分析和试剂盒，涉及定位该抑制剂的组织化学试 剂盒，涉及编码该抑制剂的DNA序列和监测抑制剂生物合成与降解的分 子探针，涉及该抑制剂的特异性抗体，涉及开发该抑制剂受体的肽兴奋 剂和拮抗剂，涉及抗抑制剂受体的特异性抗体兴奋剂和拮抗剂，还涉及 与该抑制剂连接的细胞毒性剂。

背景技术

本文中应用的术语“血管生成”指组织或器官内生长新血管，并包 括内皮细胞增殖。在正常生理条件下，人或动物只是在相当特殊的局限 境况下才经历血管生成。例如，血管生成一般见于创伤愈合，胎儿和胚 胎的发育以及黄体、子宫内膜和胎盘的形成。术语“内皮”表示衬贴于 浆膜腔、淋巴管和血管的平坦的上皮细胞薄层。

人们认为受控的和未受控的血管生成按相似方式进行。被基膜包围 的内皮细胞和周皮细胞形成毛细血管。血管生成始于内皮细胞和白细胞 释放的酶对基膜的侵蚀。然后衬于血管腔的内皮细胞穿过基膜伸出。血 管生成的刺激物诱使内皮细胞迁移穿过被侵蚀的基膜。迁移的细胞形成 脱离母体血管的“新芽”，此处内皮细胞经历有丝分裂和增殖。该内皮 新芽相互结合形成毛细血管襻，生成新血管。

持续的、未受调节的血管生成出现于大量病态、肿瘤转移和内皮细 胞反常生长中，并为见于这些疾病中的病理损伤提供证据。其中存在未 受调节的血管生成的各种病理病态已被归为血管生成依赖性疾病或血管 生成相关性疾病。

关于“肿瘤生长是血管生成依赖性的”这一假设最先提出于 1971(Folkman J.，Tumor angiogenesis：Therapeutic implications.，N. Engl.Jour.Med.285：1182-1186，1971)。在其最简单的语句中阐述：

“一旦出现肿瘤‘占领’，则每次肿瘤细胞数增加之前必有会聚在肿 瘤上的新毛细血管的增加。”肿瘤‘占领’现在被理解为肿瘤生长的 前血管期(prevascular phase)，其中肿瘤细胞群占据数立方毫米体 积且不多于数百万个细胞，它们能生存在现存的宿主微血管上。肿瘤 体积扩大到该期以外需要新毛细血管的诱导。例如，小鼠早期前血管 期中肺的微转移瘤，除非用高倍显微镜检术对组织切片检查，否则检 查不出。

支持该概念的间接证据实例包括：

(1)植入小鼠皮下透明室内的肿瘤的生长速度在形成新血管之前缓 慢且呈线性，但在形成新血管之后速度很快且接近指数形式。(Algire GH等，Vascular reactions of normal and malignant tumors in vivo.I. Vascular reactions of mice to wounds and to normal and neoplastic transplants.J.Natl.Cancer Inst.6：73-85，1945).

(2)生长于血管不增殖的隔离、灌注的器官中的肿瘤限于1-2mm³， 但当它们被移植至小鼠时就会迅速扩大到该体积的1000倍以上并变成 新血管化的肿瘤。(Folkman J，等，Tumor behavior in isolated perfused organs：In vitro growth and metastasis of biopsy material in rabbit thyroid and canine intestinal segments.Annals of Surgery 164：491- 502，1966)

(3)生长于无血管角膜内的肿瘤生长速度缓慢且呈线性，但在新血 管化后转为指数形式的生长。(Gimbrone，M.A.，Jr.等，Tumor growth and neovascularization：An experimental model using the rabbit cornea.J.Natl.Cancer Institute 52：41-427，1974)