[发明专利]一种筛选自身抗原的方法有效
申请号: | 200810089581.5 | 申请日: | 2008-04-08 |
公开(公告)号: | CN101556278A | 公开(公告)日: | 2009-10-14 |
发明(设计)人: | 赵晓航;高红军;乔媛媛 | 申请(专利权)人: | 中国医学科学院肿瘤研究所;中国人民解放军海军总医院 |
主分类号: | G01N33/53 | 分类号: | G01N33/53;G01N27/64 |
代理公司: | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 | 代理人: | 罗菊华 |
地址: | 100021北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 筛选 自身抗原 方法 | ||
1.筛选自身抗原的方法,包括步骤:
1)采用选择的细胞系作为可能含有抗原的蛋白样品的来源;
2)将所述细胞系的细胞蛋白分成亚蛋白组分;
3)以患者或健康人对照血清作为一抗,对每种蛋白组分进行一维Western印记初筛;
4)总结实验组和对照组阳性信号的规律,比较分析二者在不同分子量的印记信号差 异,包括阳性率和信号相对强弱的差异;
5)根据一维Western印记实验的结果选择可以产生自身抗体的典型血清为一抗,选择 阴性血清为对照,选择阳性率高的亚蛋白组分作为二维Western印记的可能含有抗原的蛋 白样品;
6)采用5)中选择的一抗、对照,通过二维Western印记对5)中的可能含有抗原的蛋白样 品进行筛选和质谱鉴定,
其中步骤1)中的细胞系选自人的肿瘤细胞或者其他疾病相关细胞。
2.权利要求1的方法,其中步骤2)中的亚蛋白组分包括胞浆蛋白组分,膜系统蛋白组 分,细胞骨架组份和/或细胞核蛋白组分。
3.权利要求1的方法,其中步骤2)中的分成亚蛋白组分的方法包括采用商品化的试剂 盒。
4.权利要求1的筛选自身抗原的方法,其中含有抗原的蛋白样品的来源是EC0156。
5.权利要求1的筛选自身抗原的方法,其中含有抗原的蛋白样品的来源是KYSE410细 胞。
6.权利要求4的筛选自身抗原的方法,其中筛选到的抗原是enolase-1、PGK1、HSP105、 vinculin、phosphoglyceratemutase1和triosephosphateisomerase1。
7.权利要求5的筛选自身抗原的方法,其中筛选到的抗原是P53和MBP-1。
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